2021 Fiscal Year Annual Research Report
Single cell integrated analysis of antigen specificity and gene expression for the cure of autoimmune diseases
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20K17430
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
竹下 勝 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 助教 (10571135)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | シェーグレン症候群 / 関節リウマチ / 混合性結合組織病 / 自己抗体 / 液性免疫 / 抗原特異性 / シングルセル解析 / モノクローナル抗体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では抗原特異性とシングルセル遺伝子発現解析を統合的に解析することで自己免疫病態を正確に捕捉し、根治療法につながる知見を得ることを目的としている。
今年度は関節リウマチ、シェーグレン症候群、混合性結合組織病に合併する間質性肺炎患者の肺胞洗浄液検体につき、洗浄液中のB細胞から抗体の可変領域の配列解析を行い、それを発現ベクターに組み込んでリコンビナント抗体作製を行った。それらの抗体の反応性解析を行い、肺で作られる抗体のうち、1-2割が疾患特異的な自己抗体であることが明らかにした。さらに、同定した自己抗体の可変領域のsomatic hypermutationを元に戻すことで自己抗原への反応性の減弱が認められたことから、病変部位で抗原特異的に自己抗体が作られている事を示すことが出来た。この現象は関節リウマチに対するリウマチ因子、抗シトルリン化タンパク質抗体、抗翻訳後修飾タンパク質抗体、シェーグレン症候群に対する抗SSA/Ro6抗体、混合性結合組織病に対する抗RNP抗体と、3疾患で共通した特徴であり、以上の内容を論文報告した。
また、当初の対象疾患でったシェーグレン症候群に関しては、抗SSA抗体陽性シェーグレン症候群患者、抗セントロメア抗体陽性患者、両抗体陰性非シェーグレン症候群患者の唾液腺サンプルを各3-4例収集した。唾液腺組織を機械的・酵素的にシングルセル化してクロミウムコントローラーによる遺伝子発現解析、TCR解析、BCR解析を行ない、データ解析を進めている。
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