Basic research for the novel immunotherapies targeting EMT related molecules

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K17573
• Research Institution: Asahikawa Medical College
• Principal Investigator: 石橋 佳 旭川医科大学, 医学部, 客員助教 (80646076)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: EMT関連分子

Outline of Annual Research Achievements

悪性腫瘍の浸潤・転移に関連するとされる，EMTに関与する分子「EMT関連分子」に対する特異的な免疫反応の誘導と，それを応用した免疫療法の確立に向けた基礎研究を行った．
EMT関連分子の中からTWIT，SNAIL，ZEBを選定し，コンピューターアリゴリズムを用いて，HLA classII分子（日本人に多いDR4,DR9,DR15）に親和性の高いと予想されるエピトープの候補を同定した．その候補エピトープの中から各EMT関連分子それぞれに2-3種類のペプチドを作成した．そのペプチドが特異的な免疫反応を示すCD4陽性細胞を誘導し得るかを検討した．健常人末梢血単核球（PBMC)からCD4陽性細胞を分離し，作成したペプチドで複数回刺激することで，ペプチド特異的に増殖する細胞株を樹立した．その細胞株は抗原提示細胞（APC)とペプチドとともに共培養することで，コントロールと比較して有意にIFNγを分泌した．すなわち，選定したEMT関連分子由来のペプチドは特異的なCD4陽性T細胞を誘導することがしめされた．次いで，樹立したペプチド特異的CD4陽性T細胞をそのペプチドの元となったEMT関連分子を発現している癌細胞株とともに共培養し，反応を観察した．その結果，ペプチド特異的CD4陽性T細胞はEMT関連分子陽性の癌細胞に対して，特異的な免疫応答を生じ，抗腫瘍効果を示すことが分かった．今後は，in vivoでの実験を行っていく予定である．

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

コロナウイルス感染症蔓延のため，健常人末梢血の採血が想定通りにいかず，遅れた進捗となった．

Strategy for Future Research Activity

遅れているが，計画にある通りに進めていく．

Causes of Carryover

実験に遅れが生じたため．翌年度に繰り越して実験を進めていく．