心停止ドナー肝移植の確立に向けて －灌流装置によるグラフト評価と臓器再生－

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K17575
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 柿崎 裕太 東北大学, 医学系研究科, 大学院非常勤講師 (80838037)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 肝移植 / 臓器保存 / 灌流保存 / 心停止ドナー

Outline of Annual Research Achievements

BW 27Kg - 32KgのF1ブタを用い，心拍動下に肝臓摘出をする心拍動群（Heart-beating;HB群 N=6），および20分の心停止下に肝臓を摘出する心停止群（Donation after cardiac death;DCD群 N=4）の2群に関し検討を行った．いずれも肝臓摘出後は2時間の冷保存後，灌流装置を用い120分の室温酸素化灌流を行った．灌流圧は動脈圧 70mmHg，門脈圧 20mmHgとし，灌流液はKrebs-Henseleit液を用いた
胆汁産生量は30minにおいてHB群がDCD群に比べ有意差をもって多かった（17.87±8.80 vs.4.91±2.54，P=0.03）ものの，60min，90min，120minでは有意差を認めなかった．また胆汁産生量は30min(12.68 ±9.85)，60min(23.47 ±28.24)，90min（31.21±34.19），120min（26.98±22.93）と90min でピークを迎える傾向にあることがわかった．また灌流液中のAST，ALT，LDHは30min，60min，90min，120minとすべてにおいてAST(P=0.029,
0.0073, 0.030, 0.030)，ALT（P=0.032，0.015，0.0033，0.034），LDH（P=0.022，0.0034，0.017，0.018）とDCD群で有意差をもって高値であったものの，時間当たりの変化率ではいずれも両群間で有意差を認めなった．
また組織評価では微小循環の評価として類洞開存度を検討し，アポトーシス検出目的にTUNEL染色を行い，陽性細胞数を検証した．類洞開存度およびTUNEL陽性細胞数において，DCD群は90minでHB群と有意な差を認めなかった。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

順調に実験数をこなしており，データを蓄積し，同時に解析を進めている．

Strategy for Future Research Activity

今回の検討では，室温酸素化灌流を行うことで臓器状態の維持が可能であることが示唆された．今後は灌流液の種類やその他の灌流条件を詳細に検討していく方針である．ただし，灌流条件のパラメーターが多いため，ある程度の設定条件は固定し，検討を重ねていく方針である．
新規灌流装置は灌流圧等のモニタリングが可能であり，移植可能限界にあるグラフトのViabilityの評価法の確立につながる可能性が示唆された．引き続きデータの蓄積および解析を行っていく．