2020 Fiscal Year Research-status Report
Regulation mechanism of signaling pathway by exosomal miRNA from CAF in gastric cancer
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20K17625
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| Research Institution | Osaka City University |
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Principal Investigator |
三木 友一朗 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 病院講師 (50866697)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 胃癌 / エクソソーム / micro RNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、CAFエクソソーム由来のmiRNAによる癌細胞内のシグナル伝達への影響、癌細胞制御メカニズムを解明し、またそれを通じて特定のmiRNAを新たなバイオマーカーとして同定することを目的とする。そして特定のmiRNAやmiRNAが関与するsignalling pathwayの阻害剤が治療薬として有用か評価することに繋げる。
2020年度：胃癌組織から線維芽細胞株 (CAF)を継続的に樹立している。このうち3種類のCAFの培養上清からエクソソームに含まれるRNAを抽出した。このRNAを用いて、4種類のmicroRNA (miRNA)の発現をRT-PCRにて確認を行なった。結果として、miR-5100は3種類のCAF全てにおいて発現していることが分かった。この結果は、胃癌におけるCAFに特徴的なmiRNAを同定するという本研究の目的に合致するものである。
また、CAFエクソソームのmiRNAが、Hippo signalling pathwayに関わっている可能性を検討する予備実験として、各種、胃癌細胞株を用いて、Hippo signalling pathwayにおける主要な分子であるYAPの発現についての確認を行なった。スキルス胃癌由来の細胞株である、OCUM-2MD3, OCUM-12, OCUM-14はYAPを高発現していることが分かっている。今後、miRNAによる、YAPを含むHippo signalling pathwayの調節機構についてさらに解明を進めていく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
miRNAに対するRT-PCRによるCAFエクソソームに含まれるmiRNA発現のvalidationを確実とするために、時間を要した。そのため、miRNAの癌細胞への導入を行うstep2の開始もやや遅れている。しかしながら、研究に必須である、CAFの樹立および保存は順調に進んでおり、次年度以降は順調にプランを遂行できると考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度は、がん細胞株を用いて、Hippo siganlling pathwayに関連した解析 (Step2以降)を積極的に推進する予定である。研究推進のために、グループ内の大学院生も本研究に関する実験に協力できる体制の確立を行なった。
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| Causes of Carryover |
今年度については、コロナウイルス蔓延の影響などもあり、学会が概ねWeb開催となったため、当初予定していた旅費の使用がなくなったことが影響している。次年度以降、学会再開後の旅費として使用を予定している。
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