2021 Fiscal Year Research-status Report
A novel hybrid nerve conduit for peripheral nerve regeneration
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20K18074
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Research Institution | Keio University |
Principal Investigator |
木村 洋朗 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 助教 (40627048)
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Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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Keywords | 末梢神経損傷 / 人工神経 / 再生医療 / 細胞移植 / シュワン細胞 |
Outline of Annual Research Achievements |
外径3mm、内径2mmで外層がキトサン、内層がコラーゲンの中空型人工神経を作成した。そして、以下の4群を作成し、SDラットの坐骨神経10mm欠損モデルに顕微鏡下に神経断端の架橋を行った(各群はn=10)。同人工神経のコラーゲン層にラットシュワン細胞を封入し移植した群(人工神経-細胞移植群)、同人工神経のみを移植した群(人工神経単独群)、同径のシリコンチューブに同シュワン細胞を封入し移植した群(シリコン-細胞移植群)、坐骨神経を10mm切断して反転縫合した群(自家神経群)。 移植細胞についてはレンチウイルスを用いたffLuc遺伝子導入による標識化を移植前に行い、移植細胞の生存、増殖をバイオイメージングにて追跡を行ったところ、人工神経-細胞移植群およびシリコン-細胞移植群いずれにおいても移植細胞が生存していた場合に認められるルシフェリン発光は、移植後早期の段階で消失していることが明らかになった。 また、移植後の下肢運動機能評価として歩行解析を2週間毎に実施し、術後3ヶ月まで経時的に追跡した。下肢運動機能は人工神経-細胞移植群ではシリコン-細胞移植群よりも良好な回復を認めた一方で、自家神経群には及ばない結果であった。 術後3ヶ月での組織学的評価では、トルイジンブルー染色による軸索再生、免疫組織染色および電子顕微鏡による再髄鞘化について解析した。軸索再生に関しては、運動機能評価と同様に、自家神経群が最も良好な軸索再生を認め、人工神経-細胞移植群は自家神経移植に及ばなかった一方、シリコン-細胞移植群よりも良好な回復を認めた。現在は免疫組織染色および電子顕微鏡による解析を実施中である。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
新型コロナウイルスの大流行に伴い、一定期間、研究室の入室が厳しく規制され、実験を行うことが全く許されない時期があったため、予定より進行が遅れてい る。
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Strategy for Future Research Activity |
今後の実験計画として、免疫組織染色および電子顕微鏡による解析を完了し、再髄鞘化における各群での比較検討を行う。全データ収集が終了した時点で統計学的解析を行い、本研究で最終的に得られた人工神経の有用性を明らかにした上で、英文学術論文の作成および投稿を行う。
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Causes of Carryover |
新型コロナウイルスの大流行により研究に遅延が生じた。また、同理由により国内および国際学会の現地への参加が不可能になった。 上記により生じた次年度使用額を用いて、遅延した分の動物実験費用や組織解析費用、学術論文作成費用とする。 具体的には、SDラット飼育費や組織学的評価の際に必要となる試薬の購入費用、電子顕微鏡解析費用、英文校正費用、画像編集のためのパソコン購入費用などに当てる。
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