HOTAIRによる腎癌悪性化メカニズムの探索と治療への応用

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K18131
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 方山 博路 東北大学, 大学病院, 助教 (90466558)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 腎癌 / HOTAIR / IGFBP2 / CPVL

Outline of Annual Research Achievements

代表者の先行研究では、HOTAIR-IGFBP2経路が腎癌の悪性化、特に遊走能に関与するという知見を得ており、その機序を探索する目的に実験を行った。
まず、HOTAIR過剰発現で誘導されるIGFBP2およびCPVLに着目して研究を行った。IGFBP2-Flag, CPVL-Flag 細胞を樹立し、免疫沈降法を用いた実験を行った。電気泳動で得られたバンドを切り出して、IGFBP2およびCPVLに結合するタンパク質を質量分析を用いて同定した。
IGFBP2と特異的に結合するタンパク質CMF1(Cancer Malignancy Factor1)を同定し、蛍光顕微鏡鏡による観察で、IGFBP2およびCMF1がどちらも分泌タンパクに特有な分布を示すことを確認した。CMF1は他の癌種において、増殖能には変化がないが、遊走能が亢進するという報告もあり、先行研究と矛盾しない結果となった。また、IGFBP2はエクソソーム内に分泌されることが報告されており、実際にIGFBP2が分泌タンパクとして矛盾しない分布を示すことは蛍光顕微鏡で確認できた。
今後、IGFBP2とCMF1の相互作用についてさらなる知見を得ることができれば、腎癌の新たな悪性化機序を証明することができ、新規治療につなげることが可能かもしれない。さらに、エクソソーム内でのIGFBP2を同定することで、新規バイオマーカーとなる可能性がある。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

covid-19　により安全レベル引き上げにともない、プロテオーム解析の開始が遅れたが、その後安全レベルが引き下げられたので、順調に作業を進めることができた。

Strategy for Future Research Activity

今後はIGFBP２とCMF1 の結合部位や、結合した場合の作用機序に関する研究を行い、新たな治療対象となるか調査する。並行して、エクソソーム解析により、腎癌患者におけるIGFBP２のエクソソーム内発現が、予後に関与するのではないかという仮説を証明すべく、エクソソームの研究も行う。

Causes of Carryover

予想よりも実験回数が少なかったため