2023 Fiscal Year Annual Research Report
ナノスーツ法を用いた血中循環HPV感染細胞のリアルタイムモニタリング法の確立
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20K18249
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| Research Institution | Hamamatsu University School of Medicine |
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Principal Investigator |
喜夛 淳哉 浜松医科大学, 医学部, 助教 (70868893)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | ナノスーツ法 / 腫瘍循環細胞(CTC) / リキッドバイオプシー / 中咽頭癌 / HPV |
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| Outline of Annual Research Achievements |
瘍細胞(Circulating Tumor Cells: CTC)は、血液腫瘍マーカーよりも病勢や治療効果を反映する可能性が示唆されており注目されている。CTCをナノスーツ法で観察する新手法を確立し、HPVに感染したCTCを微細構造が保たれた状態で観察及びリアルタイムでモニタリングを行うことで、HPV陽性中咽頭癌の病勢や予後判定を行うことや早期癌スクリーニングへの応用も目指す。
HPV粒子観察技術の確立を目的とし、HPVタイプ6又はタイプ11が陽性となった喉頭乳頭腫を用い検討を行った。免疫染色でHPV-L1(カプシド蛋白)陽性部位において、ナノスーツ法で観察すると約50nmの微小粒子を核内に多数認めた。透過型電子顕微鏡を用いて同一部位を観察(戻し電顕法)においても約50nmの微小粒子を多数認めた。これらからHPV粒子が観察されたものと判断した。さらにHPV粒子が観察される喉頭乳頭腫は予後不良な症例が多いことが明らかとなり、論文報告を行った。
次いで、血液での解析を試みた。HPV関連中咽頭癌や頭頸部原発不明癌でのCTC解析を試みたが、細胞数の少なさから有効な解析手法の確立に至らなかった。別の解析手法も合わせて検討を行った。HPV関連中咽頭癌ではcell free DNA(cfDNA)からHPVが検出されることや、cfDNA中のCALML5、DNAJC5G、LY6Dの3遺伝子のメチル化が病勢のマーカーとなりことを我々は報告している。頭頸部原発不明癌の90％が中咽頭癌との報告もある。この背景から頭頸部原発不明癌でcfDNA中のHPV-DNAの有無や3遺伝子のメチル化を調べた。解析した6症例中、2症例でHPV関連中咽頭癌と全く同じ結果を得ることができ、有用性を確認できた。
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