低細胞毒性の界面活性剤が有する細胞増生促進作用の研究

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K18436
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 石田 泰久 神戸大学, 医学部附属病院国際がん医療・研究センター, 特命助教 (10457062)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 両親媒性界面活性剤 / 線維芽細胞 / 細胞増生 / 創傷治療

Outline of Annual Research Achievements

両親媒性界面活性剤の一部は高濃度であっても細胞毒性を呈さずコンタクトレンズの洗浄液や創傷洗浄剤などに利用されている。両親媒性界面活性剤のPluronic F68は高濃度であっても細胞毒性を呈さず、細胞培養の培地に添加することで細胞増殖が促進されることを申請者が属するグループは証明してきた。しかしなぜPluronic F68が細胞増殖に作用するのかは明らかになっておらず、また生体において応用できるのかは証明できていない。本研究課題では両親媒性界面活性剤のPluronic F68がどのような機序で細胞増殖に作用するのかを明らかにすること,また本研究で得られた知見をもとに、両親媒性界面活性剤を創傷治療に応用していくことを目的としている。
昨年度から継続してPluronic F68が細胞増生にいかに作用するか明らかにするために、Pluronic F68とbasic fibroblast growth factorを添加した線維芽細胞培養培地と対照群(Pluronic F68のみを添加した群、basic fibroblast growth factorのみを添加した群、何も添加しない群)でルシフェラーゼアッセイを行い、それぞれのFGF-Rの活性を観察する。この結果の分析、評価を行うことでpluronic F68が細胞増生に及ぼす影響を明らかにしようとしている。これにあたり、plasmidを増やす操作、線維芽細胞の培養などをこれまでに行ってきている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

上記のような経過からルシフェラーゼアッセイにより条件によるFGF-Rの活性の差を明らかにしようとしてきた。しかし、今年度ではFBS濃度と反応時間の調整が難しく、いずれの条件でも反応がほとんど出ないという結果になっていた。このため、試薬の調整や細胞培地の調整などに時間を費やしていた。本年度ではまだ上手く本実験の結論を出すに至らずにいる。

Strategy for Future Research Activity

今年度においては、ルシフェラーゼアッセイによる定量を一旦中断し、ウエスタンブロットによるpERK蛋白の計測を行うことにより、培養条件による差異を観察していく予定である。またこれにより得られた結果を学会や論文による報告を行っていく予定である。

Causes of Carryover

実験の進捗が予定よりも停滞しており、実験条件の調整・変更を行っているため。2022年度はウエスタンブロットによるpERK蛋白の定量および、実験より得られた結果を学会や論文により発表する予定である。