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2021 Fiscal Year Research-status Report

極限環境耐性動物クマムシの持つ耐性メカニズムのダイナミズムと新規分子原理の解明

Research Project

Project/Area Number 20K20580
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

國枝 武和  東京大学, 大学院理学系研究科(理学部), 准教授 (10463879)

Project Period (FY) 2020-07-30 – 2023-03-31
Keywords乾燥耐性 / 相分離 / ゲル相転移 / ソフトマター / 弾性体 / クマムシ
Outline of Annual Research Achievements

本研究課題では、これまでに同定してきた脱水ストレスに応答して可逆的に凝集するクマムシタンパク質群 DRYPs について解析することで、新たな耐性原理の検証と提唱を目指している。本年度は、まずストレス依存に動物細胞内で繊維構造を形成するクマムシ固有の CAHS タンパク質群について、線維化がもたらす物理特性の変化と生物学的影響を解析した。in vitro における微小液滴を用いた生物物理学的解析からCAHSタンパク質溶液は非ストレス時には完全に液体状態であるが、高塩環境下では顕著なヤング率の向上を検出し弾性体に変化することを明らかにした。さらに同CAHS遺伝子の安定発現昆虫細胞株を樹立したところ、高浸透圧ストレス下において細胞表面の弾性が有意に亢進するとともに、浸透圧による細胞体積減少が顕著に抑制されることを明らかにした。また、高浸透圧下における細胞の生存率も向上することを示した。これらの成果はCAHSタンパク質の線維化が細胞の物理特性に影響を与えるとともに生物学的なストレス耐性に寄与することを示している。ストレス耐性のメカニズムとして、CAHSタンパク質のようにストレス時にオンデマンドで線維化し細胞を物理的に強化するという新たな原理を提案するものである。また、CAHS 以外の DRYPs についてもストレス時における細胞内凝集形態を網羅的に解析し、様々な凝集パターンを示すものを同定した。なお、生物物理学的解析は東大・駒場の柳澤研・澤井研との共同研究として実施した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

1: Research has progressed more than it was originally planned.

Reason

本研究課題における最重要項目であるストレス依存の可逆的な凝集体形成(線維化)がもたらす物理的特性の変化と生物学的役割について両方とも約一年前倒しで検証が完了しており進捗状況は順調である。

Strategy for Future Research Activity

CAHS タンパク質には複数のパラログが存在し、その種類によって凝集形態が異なる。また、複数のパラログが同時に存在することで協調的に凝集体を形成することも観察されていることから、今後はパラログによる凝集形態の違いをもたらすメカニズムや協調的な凝集体形成のメカニズムについても解明を進める。
また、CAHS 以外の DRYPs についてもストレス依存の凝集体形成が観察されたことから、これらの機能や協調的な役割についても解明を進める。

Causes of Carryover

コロナ禍のため、一部機器・部品の購入が遅れ間に合わなかった。また、他機関との共同研究に制約が生じ進行が遅れたため。
機器等の納入を進めるとともに、他機関との共同研究については適時実施する予定である。

  • Research Products

    (16 results)

All 2022 2021 Other

All Int'l Joint Research (1 results) Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 2 results) Presentation (10 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 4 results) Remarks (1 results)

  • [Int'l Joint Research] Durham University(英国)

    • Country Name
      UNITED KINGDOM
    • Counterpart Institution
      Durham University
  • [Journal Article] クマムシ:極限ストレス耐性のメカニズム-ヒトへの応用を展望して2022

    • Author(s)
      國枝武和
    • Journal Title

      医学のあゆみ(医歯薬出版)

      Volume: 280 Pages: 799-804

  • [Journal Article] Parallel evolution of trehalose production machinery in anhydrobiotic animals via recurrent gene loss and horizontal transfer2021

    • Author(s)
      Hara Yuichiro、Shibahara Reira、Kondo Koyuki、Abe Wataru、Kunieda Takekazu
    • Journal Title

      Open Biology

      Volume: 11 Pages: 200413~200413

    • DOI

      10.1098/rsob.200413

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Stress-dependent cell stiffening by tardigrade tolerance proteins through reversible formation of cytoskeleton-like filamentous network and gel-transition2021

    • Author(s)
      Tanaka Akihiro、Nakano Tomomi、Watanabe Kento、Masuda Kazutoshi、Honda Gen、Kamata Shuichi、Yasui Reitaro、Kozuka-Hata Hiroko、Watanabe Chiho、Chinen Takumi、Kitagawa Daiju、Sawai Satoshi、Oyama Masaaki、Yanagisawa Miho、Kunieda Takekazu
    • Journal Title

      bioRxiv

      Volume: 2021.10.02 Pages: 462891

    • DOI

      10.1101/2021.10.02.462891

    • Open Access
  • [Journal Article] 宇宙に耐える極限生物から切り拓く新たな放射線ストレス防衛機構の解明2021

    • Author(s)
      國枝武和
    • Journal Title

      医学のあゆみ(医歯薬出版)

      Volume: 279 Pages: 615-621

  • [Presentation] Unique toolbox in tardigrade anhydrobiosis2022

    • Author(s)
      Takekazu Kunieda
    • Organizer
      Royal Society Theo Murphy Meeting - Anhydrobiosis
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Stress-dependent cell stiffening by tardigrade tolerance proteins CAHS through reversible formation of cytoskeleton-like filamentous network and gel-transition2022

    • Author(s)
      Akihiro Tanaka
    • Organizer
      Royal Society Theo Murphy Meeting - Anhydrobiosis
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 脱水様ストレスに応答して線維/ゲル化するクマムシタンパク質の機能・構造解析2022

    • Author(s)
      田中彬寛
    • Organizer
      第1回乾眠生物若手の会
  • [Presentation] なぜクマムシは乾燥すると頑強になるのか?2022

    • Author(s)
      田中彬寛
    • Organizer
      第6回クマムシ学研究会
  • [Presentation] クマムシはどうやって極限環境に耐えるのか?2021

    • Author(s)
      國枝武和
    • Organizer
      大隅基礎科学創成財団 第2回市民講座
    • Invited
  • [Presentation] 放射線も平気?極限環境に耐える動物クマムシ2021

    • Author(s)
      國枝武和
    • Organizer
      日本進化学会 第23回大会公開シンポジウム
    • Invited
  • [Presentation] クマムシ固有な新規細胞骨格様タンパク質による耐性メカニズムの解析2021

    • Author(s)
      田中彬寛
    • Organizer
      日本動物学会 第92回大会
  • [Presentation] クマムシ固有の耐性タンパク質CAHSの線維/ゲル化メカニズムの解析2021

    • Author(s)
      田中彬寛
    • Organizer
      極限環境生物学会 第22回大会
  • [Presentation] クマムシ固有の乾燥耐性タンパク質による脱水ストレスに応答した可逆的な細胞骨格様線維/ゲルの形成2021

    • Author(s)
      田中彬寛
    • Organizer
      日本分子生物学会 第44回大会
    • Invited
  • [Presentation] クマムシ固有分泌型熱可溶性タンパク質SAHS1の機能解析2021

    • Author(s)
      安井玲太朗
    • Organizer
      極限環境生物学会 第22回大会
  • [Remarks] くまむし研究グループ

    • URL

      http://www.bs.s.u-tokyo.ac.jp/~saibou/kuma/

URL: 

Published: 2022-12-28  

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