Identification and control of follicular helper T cell clonotype related to donor specific HLA antibody production

2022 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20K20608
• Research Institution: Aichi Medical University
• Principal Investigator: 小林 孝彰 愛知医科大学, 医学部, 教授 (70314010)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岩崎 研太 愛知医科大学, 医学部, 准教授 (10508881) ; 三輪 祐子 愛知医科大学, 医学部, 助教 (90572941) ; 安次嶺 聡 愛知医科大学, 医学部, 講師 (00547375) ; 西村 泰治 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 名誉教授 (10156119) ; 岸 裕幸 富山大学, 学術研究部医学系, 教授 (60186210) ; 一戸 辰夫 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 教授 (80314219)
• Project Period (FY): 2020-07-30 – 2023-03-31
• Keywords: 移植・再生医療 / 腎移植 / HLA抗体 / 慢性抗体関連型拒絶反応 / 濾胞ヘルパーT細胞 / T細胞受容体クロノタイプ

Outline of Annual Research Achievements

臓器移植後の慢性拒絶反応の制御を目的とした研究であり、de novo DSA産生に関与するTCR clonotypeを同定する試みである。令和4年度には、レパトア解析により、de novo DSA産生時の末梢血単核球（PBMC）、移植前、de novo DSA産生後のPBMCを用いドナー細胞を用いたMLR刺激後の増殖CD4, CD8とは類似したTCR clonotypeの存在が判明した。私どもが昨年開発した、活性化樹状細胞がドナー細胞を貪食し、T細胞に抗原提示するindirect recognition pathwayのアッセイを用いて、レパトア解析を行ったが、上記とは共通のTCR clonotypeを見出せなかった。de novo DSA産生時のPBMC、MLR刺激後(direct recognition pathway)に検出し有力候補と考えていたTCR は、de novo DSA産生とは直接関与しない可能性が示唆された。Indirect recognition pathwayのアッセイを用い、ドナー細胞を貪食した樹状細胞により活性化したT細胞を回収してsingle cell RNA解析を行い、MLR (direct recognition pathway) により活性化したT細胞と比較した結果、まったく異なるphenotypeを持つ集団であることが判明した。しかし、十分なクローン性増殖（クローンの収束）がみられなかったことから、より効果的なペプチド抗原提示が必要とされる。ドナー細胞の貪食ではなく、シングルHLA分子、HLA高発現細胞（現在HLA class I, II遺伝子導入細胞を開発中）をも用いる。濾胞ヘルパーT細胞(Tfh)から濾胞制御性T細胞(Tfr)に向かうためには、樹状細胞への抗原の取り込み方から活性と抑制(onとoff)が切り替わる。De novo DSA産生に関わるTCRクロノタイプを同定し、産生予防（治療）という目標を達成するため、次のステップに進む課題が明確になった。

Research Products

• [Int'l Joint Research] Laboratory of Translational Immunology/UMC Utrecht(オランダ)
  • Country Name: NETHERLANDS
  • Counterpart Institution: Laboratory of Translational Immunology/UMC Utrecht
• [Int'l Joint Research] PIRCHE AG(ドイツ)
  • Country Name: GERMANY
  • Counterpart Institution: PIRCHE AG
• [Int'l Joint Research] University of Pittsburgh(米国)
  • Country Name: U.S.A.
  • Counterpart Institution: University of Pittsburgh
• [Journal Article] Estimation of Sensitization Status in Renal Transplant Recipients by Assessing Indirect Pathway CD4+ T Cell Response to Donor Cell-pulsed Dendritic Cell (2023)
  • Author(s): Kenta Iwasaki、Toshihide Tomosugi、Takashi Sekiya、Shintaro Sakamoto、Yuko Miwa、Manabu Okada、Takahisa Hiramitsu、Norihiko Goto、Shunji Narumi、Yoshihiko Watarai、Mai Okumura、Satoshi Ashimine、Kohei Ishiyama、Ezzelarab Mohamed B.、Takaaki Kobayashi
  • Journal Title: Transplantation Volume: 107 Pages: 1079～1088
  • DOI: 10.1097/TP.0000000000004491
• [Presentation] T 細胞エピトープは妊娠感作後の de novo DQ/DR DSA 予測に有用 (2023)
  • Author(s): 安次嶺聡、坂本慎太郎、雫真人、三輪祐子、岩﨑研太、鳴海俊治、渡井至彦、石山宏平、小林孝彰T 細胞エピトープは妊娠感作後の de novo DQ/DR DSA 予測に有用
  • Organizer: 第56回日本臨床腎移植学会
• [Presentation] Which is More Important for Predicting De Novo DSA Production, B Cell Epitope (EPLET) or T Cell Epitope (PIRCHE) Analysis ? (2022)
  • Author(s): T. Kobayashi, T. Tomosugi, S. Sakamoto, S. Ashimine, K. Iwasaki, M. Niemann, E. Spierings, Y. Miwa{1}, M. Okumura, K. Ishiyama, A. Takeda, N. Goto, S. Narumi, Y. Watarai
  • Organizer: American Transplant Congress (ATC) 2022
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Establishment of an In Vitro Assay to Evaluate Indirect T-cell Allo-Response Using Donor PBMC-Pulsed Dendritic Cells. (2022)
  • Author(s): K. Iwasaki, T. Tomosugi, T. Sekiya, H. Hamana, Y. Miwa, K. Futamura, M. Okada, T. Hiramitsu, N. Goto, S. Narumi, Y. Watarai, H. Kishi, M. Okumura, S. Ashimine, K. Ishiyama, T. Kobayashi
  • Organizer: American Transplant Congress (ATC) 2022
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Validation of Shared T Cell Epitope Analysis as a Tool to Detect Preformed Donor-Reactive CD4+ Memory T-helper Cells. (2022)
  • Author(s): T. Tomosugi1, K. Iwasaki, S. Sakamoto, K. Ftamura, M. Okada, T. Hiramitsu, N. Goto, S. Narumi, Y. Watarai, T. Kobayashi
  • Organizer: American Transplant Congress (ATC) 2022
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Bioinformatics を用いた遺伝子解析によるバイオマーカーの探索 (2022)
  • Author(s): 田中 一樹、岩﨑 研太、三輪 祐子、細道 一善、小林 孝彰
  • Organizer: 第55回日本臨床腎移植学会
• [Presentation] 小児腎移植の DSA と AMR (2022)
  • Author(s): 日比野聡、小林孝彰、武田朝美、松林宏樹、藤浦直子、野末圭祐、服部俊彦、笠置俊希、寺野千香子、山口玲子、田中一樹、藤田直也
  • Organizer: 第55回日本臨床腎移植学会
• [Presentation] 樹状細胞を用いた間接アロ応答検出系による腎移植患者感作の把握 (2022)
  • Author(s): 岩崎研太、友杉俊英、関谷高史、三輪裕子、石山宏平、安次嶺聡、Mohamed B. Ezzelarab、小林孝彰
  • Organizer: 第30回日本組織適合性学会
  • Invited
• [Presentation] ドナー感作歴をもつ腎移植レシピエントのde novo DSA産生予測にB細胞エピトープ解析とT細胞エピトープは有用か？ (2022)
  • Author(s): 安次嶺聡、友杉俊英、坂本慎太郎、雫真人、岡田学、三輪裕子、岩崎研太、 鳴海俊治、渡井至彦、石山宏平、小林孝彰
  • Organizer: 第30回日本組織適合性学会
• [Presentation] In silico DSA産生予測と、樹状細胞を用いたindirect alloresponse検出系による感作把握 (2022)
  • Author(s): 岩﨑研太、友杉俊英、関谷高史、三輪祐子、石山宏平、安次嶺聡、 Mohamed B. Ezzelarab、Xiuyuan Lu、山崎晶、小林孝彰
  • Organizer: 第58回日本移植学会
  • Invited
• [Presentation] de novo DSA早期診断のためのT細胞受容体レパトア解析 (2022)
  • Author(s): 雫真人、安次嶺聡、石山宏平、三輪祐子、岩﨑研太、小林孝彰
  • Organizer: 第58回日本移植学会
• [Presentation] 腎移植後の急性拒絶反応とBKウイルス血症はde novo DSA産生の契機となる (2022)
  • Author(s): 安次嶺聡、雫真人、三輪祐子、岩﨑研太、石山宏平、小林孝彰
  • Organizer: 第58回日本移植学会
• [Presentation] 免疫グロブリン療法は間接アロ免疫応答を増強する？ (2022)
  • Author(s): 雫真人、雫真人、岩﨑研太、岡田学、三輪裕子、安次嶺聡、石山宏平、小林孝彰
  • Organizer: 第48回日本臓器保存生物医学会
• [Presentation] In silico と in vitro 解析における de novo DSA リスク評価 (2022)
  • Author(s): 岩﨑研太、友杉俊英、関谷高史、三輪裕子、石山宏平、安次嶺聡、Mohamed B.Ezzelarab、Xiuyuan Lu、山崎晶、小林孝彰
  • Organizer: 第48回日本臓器保存生物医学会
  • Invited