2020 Fiscal Year Research-status Report

がん微小環境におけるCXCL13産生T細胞解析を起点としたヒトがん免疫機構解明

Research Project

Project/Area Number	20K20610
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	吉富啓之京都大学, 医学研究科, 准教授 (50402920)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	上野英樹京都大学, 医学研究科, 教授 (50850442) 濱西潤三京都大学, 医学研究科, 講師 (80378736)
Project Period (FY)	2020-07-30 – 2024-03-31
Keywords	CXCL13 / がん微小環境 / T細胞 / Tph細胞 / 炎症性サイトカイン
Outline of Annual Research Achievements	申請者はこれまでにヒト検体を用いた研究より、関節リウマチ等の炎症環境下でケモカインCXCL13を産生する新たなCD4T細胞分画（Tph細胞）を同定しその機能を明らかにしてきた。本研究ではこれまでのT細胞研究をがん免疫研究に応用し、がん組織に存在するCXCL13を産生するCD4およびCD8陽性T細胞の分子機構を解明する。これらの細胞のがん抗原特異性とともに表現型や抗がん作用を明らかにすることを目的とし、さらにその分化機構と抗がん作用を制御することで新たながん治療をめざす。令和2年度は婦人科がん（CXCL13の発現が患者の良好な予後と相関していることが知られる）に浸潤するT細胞に対して解析を行った。その結果、腫瘍環境下におけるCD4陽性T細胞ならびにCD8T細胞にはCXCL13を産生する細胞群が存在し、それらはいくつかの分画に細分化された。また、T細胞受容体配列の解析より、腫瘍内CD8陽性T細胞はCD4陽性T細胞と比較してoligoclonalなクローンが増加しており、腫瘍組織環境におけるCD8陽性T細胞の増殖が示唆された。また関節リウマチ環境におけるT細胞と遺伝子発現を比較した所、CD4陽性T細胞においても細胞傷害性分子の発現を腫瘍組織で認めたことから、腫瘍内リンパ球の機能や制御は環境独自の周囲環境に影響されていることが示唆された。これらのことから、今後は腫瘍環境リンパ球において活性化しているシグナル経路を抽出することにより、腫瘍環境下におけるリンパ球の分化経路を明らかにすることでこれらのリンパ球のがん免疫における役割を明らかにする。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 検体量が限られる腫瘍臨床検体にscRNA-seqを遂行し、他の炎症性疾患のリンパ球と比較することで、腫瘍環境独自にリンパ球に作用する因子の抽出が行えている。さらにTCR配列解析を行うことで、oligoclonalな増殖を伴うT細胞を選択的に解析することが可能になっている。
Strategy for Future Research Activity	令和3年度はさらに症例数を重ね、腫瘍環境下でのリンパ球の形質に関連する因子の同定を行う。さらにそれらのデータに基づき、in vitroの分化誘導系にて腫瘍環境と細胞機能の関連を解明する。また、がんに存在する異所性リンパ濾胞やB細胞の存在が患者の予後と関連することが知られているが、その分子機構の詳細については明らかでない。リンパ濾胞形成やB細胞分化に関わるCXCL13を産生する腫瘍内T細胞と異所性リンパ組織形成やB細胞分化との関連を解析するために画像的解析等にて、CXCL13産生T細胞と異所性リンパ濾胞形成の関連や、CXCL13産生T細胞と腫瘍内B細胞との局在を解析する。