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2022 Fiscal Year Research-status Report

Inner ear cell therapy by activated stem cell homing

Research Project

Project/Area Number 20K21662
Research InstitutionJuntendo University

Principal Investigator

神谷 和作  順天堂大学, 医学部, 准教授 (10374159)

Project Period (FY) 2020-07-30 – 2024-03-31
Keywords遺伝性難聴 / 人工多能性幹細胞 / 内耳 / ギャップジャンクション / 分化誘導
Outline of Annual Research Achievements

コネキシン(CX)26をコードするGJB2遺伝子の変異は、世界で最も高頻度に出現する難聴原因遺伝子である。 遺伝性難聴の根本的治療法は存在しないが、多機能性幹細胞を用いた再生医療の応用が期待されている。研究代表者らは、内耳ギャップ結合を形成するCX26の内耳特異的欠損マウスを開発し、ギャップ結合崩壊による発症機構を解明し、この異常ギャップ結合を遺伝子導入により修復することで聴力回復させる内耳遺伝子治療法を開発した。幹細胞から作製した内耳前駆細胞を蝸牛組織へ導入するためには蝸牛組織に適切な幹細胞ホーミングと呼ばれる細胞誘導の分子機構を理解し応用することが重要である。本研究では、この機構を高めることにより遺伝性難聴の内耳組織へ適切な細胞を効率的に補充し、聴力を回復させる技術開発を目的とする。本年度は移植用細胞として多能性幹細胞由来の内耳用細胞を開発するため、これまで確立した分化誘導法のさらなる改良を目指した。蝸牛支持細胞の特徴を有するヒトiPSC由来の機能性CX26ギャップジャンクション形成細胞(iCX26GJCs)を作製することを試みたところ、このiCX26GJCsは、細胞-細胞間の境界にギャップジャンクションプラーク様の形態を持ち、蝸牛支持細胞で発現するいくつかのマーカーの発現を確認した。さらに、典型的なGJB2変異を持つ患者のiPS細胞からiCX26GJCsを作製し、GJB2関連難聴の病態を再現することに成功した。これらのin vitroモデルは、GJB2関連難聴の様々な変異に対する最適な治療法の確立や薬剤スクリーニングに有用であると考えられ、国際誌にも論文発表した(Human Molecular Genetics, 2021)。同技術に更に作製条件を精査することにより、細胞境界にて凝集したギャップ結合複合体を形成する高分化型の細胞シートを作製することに成功した。さらにこれらを継代可能とする技術を開発し、移植用細胞としての応用が期待できる。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

分化誘導法に関し新たな改良法が得られ、安定的にギャップ結合形成細胞を形成させることが可能となった。これらの技術を応用することにより細胞治療に用いる移植細胞の開発が期待できるため。

Strategy for Future Research Activity

得られた移植細胞を難聴モデルマウスにへ移植する技術を確立する。

Causes of Carryover

新型コロナウィルスにより、学会参加旅費が使用不可となったことや、細胞培養等の業務量が減少し、それに伴う消耗品の消費も減少しため。
翌年度として、学会旅費の使用再開や細胞培養との業務量を増加させる予定であり、消耗品支出は増加すると思われる。

  • Research Products

    (4 results)

All 2022

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Open Access: 2 results) Presentation (2 results) (of which Invited: 2 results)

  • [Journal Article] Effects of salicylate derivatives on localization of p.H723R allele product of SLC26A42022

    • Author(s)
      Murakoshi Michio、Koike Yuhi、Koyama Shin、Usami Shinichi、Kamiya Kazusaku、Ikeda Katsuhisa、Haga Yoichi、Tsumoto Kohei、Nakamura Hiroyuki、Hirasawa Noriyasu、Ishihara Kenji、Wada Hiroshi
    • Journal Title

      Auris Nasus Larynx

      Volume: 49 Pages: 928~937

    • DOI

      10.1016/j.anl.2022.03.009

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Association Between Earwax‐Determinant Genotypes and Acquired Middle Ear Cholesteatoma in a Japanese Population2022

    • Author(s)
      Hara Satoshi、Kusunoki Takeshi、Nakagawa Hiroshi、Toyoda Yu、Nojiri Shuko、Kamiya Kazusaku、Furukawa Masayuki、Takata Yusuke、Okada Hiroko、Anzai Takashi、Matsumoto Fumihiko、Ikeda Katsuhisa
    • Journal Title

      Otolaryngology Head Neck Surgery

      Volume: 166 Pages: 139~145

    • DOI

      10.1177/01945998211000374

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] GJB2遺伝子変異型難聴に対するAll-in-one AAV vectorをもちいたゲノム編集治療法の開発2022

    • Author(s)
      神谷和作、宇梶太雄、中川綾哉、濡木理
    • Organizer
      第45回日本分子生物学会年会
    • Invited
  • [Presentation] マウスES細胞をもちいたGJB2遺伝子変異型難聴モデルの開発2022

    • Author(s)
      神谷和作、新井大祐
    • Organizer
      第45回日本分子生物学会年会
    • Invited

URL: 

Published: 2023-12-25  

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