2020 Fiscal Year Research-status Report
Construction of basophil/liposome hybrid secretory system and its application to cell therapy and DDS.
| Project/Area Number |
20K21906
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
平嶋 尚英 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 教授 (10192296)
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| Project Period (FY) |
2020-07-30 – 2023-03-31
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| Keywords | 分泌細胞 / 巨大リポソーム / 人工細胞 / 細胞治療 / DDS |
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| Outline of Annual Research Achievements |
（１）微小リポソーム含有細胞サイズの巨大リポソーム
W/Oエマルション遠心法により細胞サイズの巨大リポソームに微小リポソーム（分泌小胞に相当）を封入した巨大リポソームの構築を行った。さらに、微小リポソーム膜に、エクソサイトーシスに関与するSNARE(N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptor）であるVAMP8（膜１回貫通タンパク質）を組み込むめに、無細胞発現系でVAMP8発現させることには成功したが、それを高濃度で微小リポソームに組み込むまでには至らなかった。
（２）人工系（細胞サイズ巨大リポソーム）と生細胞系（RBL-2H3細胞）の融合
巨大リポソームと好塩基球の膜融合を、Saitoらの方法（A.C. Saito et al., A method for cell-giant unilamellar vesicle electrofusion, PLoS One 9, e106853 (2014)）に従って、electrofusion法により行った。細胞サイズの巨大リポソームに蛍光色素であるカルセインを封入し、RBL-2H3細胞とelectrofusion法により融合させることを試みた。交流電圧、直流パルスの条件を様々に変えて、最適融合条件を見出すための条件検討を行った。様々な電場条件で、巨大リポソームと生細胞の融合を試みたが、蛍光色素であるカルセインを内包したRBL細胞は認められなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
本研究は、購入備品として挙げている細胞融合装置（ネッパジーン ECFG21）を使って行う研究であるが、研究費が利用可能となったのは11月以降であり、コロナ感染症もあり業者によるデモンストレーションも遅れ、当該機器の研究室への導入が遅れたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
細胞融合装置も導入され、実際に稼働している。
まずは、細胞サイズの巨大リポソームとRBL-2H3細胞の最適融合条件を見出すことを最優先して研究を推進する。
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| Causes of Carryover |
次年度使用額は543円と少額（端数）であり、研究計画通りに執行されている。
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