2021 Fiscal Year Annual Research Report
マラリア原虫ガメトサイト期に赤血球内に形成される膜構造物の生理機能
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20K22767
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
宮崎 真也 長崎大学, 熱帯医学研究所, 助教 (40637435)
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| Project Period (FY) |
2020-09-11 – 2022-03-31
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| Keywords | マラリア原虫 / ガメトサイト / 赤血球 / 膜構造 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、熱帯熱マラリア原虫ガメトサイトが赤血球の細胞質内に新たに形成する膜構造物の生理的意義を解明することを目的としている。熱帯熱マラリア原虫は、ヒト赤血球内でガメトサイトへと分化することにより、蚊に感染する能力を得る。このガメトサイト分化の過程で、マラリア原虫は赤血球の細胞質内に新たな膜構造物を作り出すが、その生理的意義はよくわかっていない。 本研究では、これらの膜構造物のガメトサイト分化における役割を明らかにすることを試みた。本研究において、研究代表者は熱帯熱マラリア原虫がガメトサイトを効率よく形成する条件を確認した。続いて、熱帯熱マラリア原虫ガメトサイトが感染した赤血球の中における膜構造を電子顕微鏡により観察した。その結果、感染赤血球の中に、原虫細胞とは異なる特徴的な膜構造が存在することが分かった。この後に、熱帯熱マラリア原虫の遺伝子改変によるノックダウン実験系の構築に着手した。最初に、ステージ特異的なノックダウン系に用いるベーシックプラスミドを構築し、ノックダウン系がワークすることをコントロール遺伝子や複数の機能未知遺伝子を対象にして確認した。これらの知見を基盤として、目的のノックダウン原虫を作出するためのプラスミドを10種類以上クローニングし、一部のプラスミドを熱帯熱マラリア原虫にトランスフェクションした。その過程でガメトサイト形成株において、トランスフェクション効率が低いことが分かったため、目的の原虫作出に先立ち、種々の条件検討を行い、遺伝子改変技術の基盤を整えた。今後も引き続き、ガメトサイト期に形成される膜構造に局在すると予想される分子の遺伝子改変原虫の作出および表現型解析を進めていく。
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