2021 Fiscal Year Annual Research Report
細胞接着分子に注目した胃癌進展機序解明と革新的治療戦略の構築
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20K22831
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
中澤 信博 群馬大学, 医学部附属病院, 助教 (60881290)
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| Project Period (FY) |
2020-09-11 – 2022-03-31
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| Keywords | 胃癌 / コネキシン26 / Wnt/βcatenin経路 / EMT |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では胃癌における細胞間接着分子、特にコネキシン26（Cx26）に注目し検討を行っている。現在までの研究成果として、胃癌症例において、本来細胞膜でギャップ結合を形成するCx26は細胞質に染色され、癌化に伴い局在の変化を認めた。また腸型・混合型胃癌において、Cx26発現症例では有意に予後良好に対し、びまん型胃癌ではこの差を認めなかった。EMT誘導、がん幹細胞性に関連することが報告されているWnt/β-catenin経路とCx26の関係に着目し諸検討を行うこととし以下の研究を遂行した。
・細胞質のCx26とβ-cateninの関係を検討
In situ Proximity Ligation Assay（PLA）で検討を行ったところ、細胞質Cx26とβ-cateninの結合所見を認めた。またMKN7、MKN74、MKN45を使用し共免疫沈降（Co-IP)を施行したところ、Co-IPでも細胞質Cx26とβ-cateninの結合所見を認めた。細胞質Cx26はβ-cateninと結合することでβ-cateninの核内移行を抑制している可能性が示された。胃癌症例でβ-cateninの免疫染色を追加検討したところ、腸型・混合型胃癌において、Cx26低発現と核内β-catenin高発現は統計学的有意差を認め、臨床検体においても同様の結果が得られた。
・上記詳細検討のため、MKN7、MKN74、MKN45、GCIYを使用しCx26強制発現細胞株を樹立し、いずれの細胞株においてもCx26高発現はWST-assayにて増殖能の低下を認め、核分画のβ-catenin発現は低発現となった（Western blotting）。
・MKN74を仕様しCage解析を施行し、Cx26過剰発現群ではWnt/β-catenin経路の抑制を示した。
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Research Products
(2 results)
