2021 Fiscal Year Annual Research Report
Ewing肉腫におけるdormant cellの同定とその特性の探索
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20K22847
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
竹森 俊幸 神戸大学, 医学部附属病院, 医員 (20884456)
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| Project Period (FY) |
2020-09-11 – 2022-03-31
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| Keywords | dormant cell / Ewing肉腫 / Tet on system |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、Ewing肉腫における再発・転移のメカニズム解明のために既存のヒトEwing肉腫細胞株から、治療抵抗性の要因と考えられているdormant cellを同定・分離することを目的とした。
我々は、細胞分裂時に分解されるH2Bと蛍光蛋白GFP融合蛋白（H2B-GFP）の遺伝子発現をドキシサイクリン（DOX）依存性に制御できるTet onシステムを用いてヒトEwing細胞株RD-ESからdormant cellの同定・分離を行った。2日間のDOX刺激後、DOXを除去して3日間培養を行った後にH2B-GFP蛋白質が分解されずにGFP蛍光を保持する細胞（RD/GFP+）をフローサイトメトリーを用いてdormant cellとして同定・分離することに成功した。
同定・分離されたdormant cellの割合は全細胞数の約1.5％と非常に少数の細胞集団であった。同定・分離されたdormant cellの細胞増殖能をWST-8 assayにて評価したところ、細胞増殖能の低下を認めた。また、doxorubicinに対する抗がん剤耐性能の評価でも同定・分離されたdormant cellは抗がん剤耐性能を持つことを明らかとなった。以上より同定・分離された細胞はdoramant cellの特徴を有することが明らかとなった。
非常に少数の細胞集団であるdormant cellを既存の細胞株から同定・分離することに成功した本研究は、今後のがん治療研究分野において、がんの再発・転移を早期診断・治療できる可能性があるという点で非常に意義深いと考える。
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