平滑筋ミオシン変異による家族性大動脈解離の分子機構解明と治療法開発

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K22932
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 澤城 大悟 自治医科大学, 医学部, 講師 (40456132)
• Project Period (FY): 2020-09-11 – 2022-03-31
• Keywords: 平滑筋ミオシン重鎖 / 大動脈平滑筋 / 細胞老化

Outline of Annual Research Achievements

Myh11変異マウスのフェノタイプ解析を目的として平滑筋ミオシンの遺伝子変異（Exon29 del1263K）による家族性大動脈瘤/解離家系を報告し、改良Crispr-Cas9系で同一変異をC57BL/6マウスに導入した。本研究ではまず、変異マウスと野生型マウスの表現型を比較検討を行った。Myh11ミオシンヘテロ変異マウスでは、ヘテロおよびホモマウスではフェニレフリン(Phe)に対する大動脈収縮反応が低下することを明らかにした。今後大動脈の収縮・弛緩機能についてのバイオマーカー、大動脈の組織学的評価、血管壁で発現するRNAの定量的解析、血管平滑筋ミオシンの分子機能など）を解析し、各遺伝子型のマウスで大動脈負荷刺激(アンギオテンシン II, βアミノプロピオニトリル等)を行い、大動脈解離発症モデルを作成することを予定する。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

Myh11変異マウスのフェノタイプ解析を目的として平滑筋ミオシンの遺伝子変異（Exon29 del1263K）による家族性大動脈瘤/解離家系を報告し、改良Crispr-Cas9系で同一変異をC57BL/6マウスに導入した。当マウスは妊孕性が低く、解析対象マウスの確保に難渋している。同様に初継代細胞採取による血管平滑筋細胞培養も遅延しており in vitroでの解析が同様にやや遅延している。

Strategy for Future Research Activity

今後はMyh11マウスの繁殖を待ち、大動脈の収縮・弛緩機能についてのバイオマーカー、大動脈の組織学的評価、血管壁で発現するRNAの定量的解析、血管平滑筋ミオシンの分子機能など）の解析を進める。また各遺伝子型のマウスで大動脈負荷刺激(アンギオテンシン II, βアミノプロピオニトリル等)を行い、大動脈解離発症モデルを作成することを予定し平滑筋細胞老化と組織脆弱性の関連を評価する。

Causes of Carryover

R2年度よりのマウス繁殖を継続しておりR3年度へ支払いを繰り越す予定としている。
またR3年度は変異平滑筋採取・細胞ラインの樹立のため特殊技能者に業務委託の
方針としている。