平滑筋ミオシン変異による家族性大動脈解離の分子機構解明と治療法開発

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K22932
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 澤城 大悟 自治医科大学, 医学部, 講師 (40456132)
• Project Period (FY): 2020-09-11 – 2023-03-31
• Keywords: 平滑筋ミオシン重鎖 / 大動脈平滑筋 / 細胞老化

Outline of Annual Research Achievements

Myh11変異マウスのフェノタイプ解析を目的として平滑筋ミオシンの遺伝子変異（Exon29 del1263K）による家族性大動脈瘤/解離家系を報告し、改良Crispr-Cas9系で同一変異をC57BL/6マウスに導入した。
本研究ではまず、変異マウスと野生型マウスの表現型を比較検討を行った。Myh11ミオシンヘテロ変異マウスでは、ヘテロおよびホモマウスではフェニレフリン(Phe)に対する大動脈収縮反応が低下することを明らかにした。
今後大動脈の収縮・弛緩機能についてのバイオマーカー、大動脈の組織学的評価、血管壁で発現するRNAの定量的解析、血管平滑筋ミオシンの分子機能など）を解析し、各遺伝子型のマウスで大動脈負荷刺激(アンギオテンシン II, βアミノプロピオニトリル等)を行い、大動脈解離発症モデルを作成することを予定する。
またMyh11変異マウス胎児線維芽細胞を使用し放射線障害・化学障害による細胞老化への反応性相違について検討を行い、大動脈壁脆弱性等平滑筋機能不全についての基礎的検討を進めている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

Myh11変異マウスのフェノタイプ解析を目的として平滑筋ミオシンの遺伝子変異（Exon29 del1263K）による家族性大動脈瘤/解離家系を報告し、改良Crispr-Cas9系で同一変異をC57BL/6マウスに導入した。当マウスは妊孕性が低く、解析対象マウスの確保に以前難渋している。同様に初継代細胞採取による血管平滑筋細胞培養も遅延しており in vitroでの解析が同様にやや遅延している。

Strategy for Future Research Activity

今後はMyh11マウスの繁殖を加速させ、大動脈の組織学的評価、血管壁で発現するRNAの定量的解析、血管平滑筋ミオシンの分子機能など）の解析を進める。また各遺伝子型のマウスで大動脈負荷刺激(アンギオテンシン II, βアミノプロピオニトリル等)を行い、大動脈解離発症モデルを作成することを予定し、平滑筋細胞老化と組織脆弱性の関連を評価する。

Causes of Carryover

遅延しているモデルマウスの繁殖を継続し、R4年度ではMYH11変異の大動脈疾患に対しての寄与・細胞老化を介したメカニズムの解明を進める予定としている。R4年度使用予定の研究費は主に免疫染色等解析用実験試薬の購入、マウスモデル研究補助への謝金等に充当する予定としている。