シングルセル解析による肉腫浸潤Tリンパ球応答の解明

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K22980
• Research Institution: Sapporo Medical University
• Principal Investigator: 村田 憲治 札幌医科大学, 医学部, 特任助教 (80722454)
• Project Period (FY): 2020-09-11 – 2022-03-31
• Keywords: 腫瘍免疫 / 骨軟部肉腫 / 肉腫浸潤Tリンパ球 / シングルセル解析 / T細胞受容体

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、シングルセル解析プラットフォームを用いて肉腫細胞に浸潤したリンパ球（TIL）のT細胞受容体（TCR）レパトアを解析し、肉腫反応性TCRと認識抗原を同定することである。93歳、女性の右前腕部に発生した粘液性炎症性線維芽細胞肉腫の切除片からTILを分離してシングルセル解析装置（10x Genomics社 Chromium Controller）を用いてTCRレパトア解析を行なったところ、クローナリティーの極めて高い2種類の TCRが存在し、CD8陽性TILの40%を占める結果となった。これらを含めた上位5種類のTCRをクローニングしてTCR遺伝子導入T細胞（TCR-T細胞）を作成し、抗原同定のプローベとして用い肉腫抗原を同定する。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

肉腫TILのシングルセル解析からTCR-T細胞作成に至るプロトコールは確立し、様々な肉腫に対して行なっている。現在、抗原候補となる肉腫細胞株も作成している。

Strategy for Future Research Activity

平滑筋肉腫や未分化多形肉腫などの予後不良症例に対する解析・TCRクローニングも行う。また、クローニングしたTCRの肉腫反応性を調べ、認識する肉腫抗原を探索する。