| Research Abstract |
本申請研究の目的は,生体内輸送蛋白質(リポカリン型プロスタグランジンD合成酵素,L-PGDS)を用いたドラッグ・デリバリー・システム(DDS)の創製である。本年度は,概ね研究実施計画どおりに研究を遂行できた。まず,多次元NMR法,及びX線小角散乱法を用い,難水溶性薬剤である(DZP,GABA_A受容体作動薬),及びNBQX(AMPA型グルタミン酸受容体拮抗剤)とL-PGDS複合体の解析を行った結果,両薬剤がL-PGDSの疎水性ポケット内部に結合し,それに伴ってL-PGDSがコンパクトになることが判明した。この輸送体自身のコンパクトパッキングは,薬剤を目的組織に輸送するための重要な性状であると考えられる。一方,薬剤に体する結合親和性の異なる20種類の変異体L-PGDSを作製することに成功した。DZPと変異体L-PGDSとの結合親和性,及び変異体L-PGDS溶液におけるDZPの溶解度を測定した結果,結合親和性の高い変異体ほど,DZPの溶解度が上昇することが判明した。今後,in vivoにおける各種変異体/DZP複合体の薬理効果を調べる。また,次年度遂行予定であった,ヌードマウス移植ヒト腫瘍(xenograft)モデルを構築することができた。ヒト大腸癌細胞株であるDLD-1細胞をヌードマウスに移植し,難水溶性抗がん剤であるSN-38とL-PGDS複合体を癌組織に直接注入することにより,L-PGDS単独投与群に比べて,有意に癌組織を縮小できることが判明した。さらに,新生血管の内皮細胞に発現する膜貫通蛋白質CD13を認識するペプチド(Asn-Gly-Arg)モチーフをL-PGDSに導入した変異体L-PGDSの作製にも成功しており,今後Xenograftモデルにおいて,SN-38との複合体を静脈内投与することにより,その効果を調査する。
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