2010 Fiscal Year Annual Research Report
インテリジェント人工核酸を搭載したナノDDSによる革新的分子標的治療薬の研究
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21229002
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
佐々木 茂貴 九州大学, 大学院・薬学研究院, 教授 (10170672)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
原島 秀吉 北海道大学, 薬学研究院, 教授 (00183567)
野村 政壽 九州大学, 大学病院, 講師 (30315080)
永次 史 東北大学, 多元物質科学研究, 教授 (90208025)
新藤 充 九州大学, 先導物質化学研究所, 教授 (40226345)
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| Keywords | 核酸医薬 / 薬物送達 / 2型糖尿病 / 疾患モデルマウス / ミトコンドリア / 機能性人工核酸 |
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| Research Abstract |
本研究では、遺伝子応答性インテリジェント人工核酸を搭載した臓器特異的ナノDDSを合成し、疾患モデル動物での機能検証を経て、疾患関連mRNAおよびmiRNAを標的とするナノ分子標的治療薬の創製を目指す。
佐々木グループ:官能基転移人工核酸の反応解析を行った。野村グループとの共同により、細胞内でmiRNAを標的とする評価系で人工核酸の効果を検討し、アンチmiRNA効果を確認した。mRNAに対して官能基転移反応が高収率で起こることを確認した。この修飾mRNAはタンパク質発現には大きな効果を与えないことが分かった。
永次グループ:2'-OMe型AVPが標的チミンに対して高選択的に反応することを見出した。前後配列が3'GXC5'に治しては、中性条件下、RNA中のウラシルに対して高効率に反応し、細胞内miRNAの阻害に成功した。
新藤グループ:ボンクレキン酸のカルボン酸をエステルに変換するとHeLa細胞に対して毒性が増強されることを明らかにした。一方、このジカルボン酸部分構造の炭素鎖末端にカルボン酸を付与したトリカルボン酸は一転して細胞毒性は消失し、アポトーシス阻害効果が発現した。
野村グループ:膵β細胞株であるMIN6細胞を用いてオリゴ核酸によるmiR-375の機能阻害を確認した。マウス膵ランゲルハンス島を単離し、miR-375に対するオリゴ核酸をリポフェクション法にて導入したところ、膵ラ氏島中心部への到達は不十分であったが、表面から50μm前後までのほぼ全ての膵β細胞へのオリゴ核酸の導入が認められ、十分にin vivO応用が可能であることが示唆された。
原島グループ:R8ペプチド、GALAペプチドを組み合わせ、肝臓に効率的にpDNAを送達可能なR8-GALA-MENDの構築に成功した。更にこのシステムにsiRNAを搭載し、内在性遺伝子の発現抑制に成功した。Mt移行性素子MTSを付加したMTS-MITO.Porterの構築に成功し、Mt移行能を飛躍的に向上させた。また、MITO-PorterがmtDNAの存在するマトリクス領域へ送達可能である事を示した。さらに、オリゴ核酸のMITO-Porterへのパッケージング技術も確立した。
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