2009 Fiscal Year Annual Research Report
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21247025
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| Research Institution | Suzuka University of Medical Science |
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Principal Investigator |
饗場 弘二 Suzuka University of Medical Science, 薬学部, 教授 (20025662)
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| Keywords | 小分子RNA / Hfq / 翻訳抑制 / 塩基対形成 / 大腸菌 / RNAオリゴ / 転写終結シグナル / 試験管内翻訳 |
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| Research Abstract |
解糖系の阻害が大腸菌グルコーストランスポーター遺伝子(ptsG)の発現を転写後段階で抑制することの発見を契機とした一連の研究により、この制御にRNA結合タンパク質HfqとsRNAの1つSgrSが関与していること、SgrSはHfqを介してRNase Eと複合体を形成しptsG mRNAとの塩基対形成により翻訳の抑制とRNase Eに依存したmRNA分解を引き起こすことなどを明らかにし、原核生物におけるsRNAによる遺伝子発現制御の原理を理解するための研究を先導してきた。本研究の目的は、(1)SgrSが標的であるptsG mRNAを特異的に認識する機構、(2)Hfqが塩基対形成を促進する分子機構、(3)SgrS/Hfq/RNase E複合体によるptsG mRNA分解の分子機構と生理機能、(4)代謝ストレスがSgrSの転写を誘導する機構に焦点を当てsRNAの作動原理の解明を目指すことである。平成21年度は、目的(1)と(2)に沿った研究を行い以下の成果を得た。1)ptsG mRNAの翻訳開始領域に相補的な種々の長さの合成RNAを用い、ptsG mRNAとの塩基対形成反応をゲルシフト法により解析した。また、試験管内での翻訳抑制能を解析した。この結果SgrSの14塩基領域が安定な塩基対形成および翻訳阻害に必要な最小領域であることを明らかにした。この成果は、SgrSによるptsG mRNAの特異的認識機構を解明する上で重要な鍵となる。2)SgrSの転写終結シグナルとなるステムループ領域、およびそれに続くポリU配列に変異を導入させたSgrS変異体の解析を行い、SgrSのポリU配列がSgrSによるptsGの抑制機能に重要であることを明らかにした。また、SgrSの転写終結配列の5'側の、ステムループ構造を形成する領域も重要であることを明らかにした。これらの結果はsRNA作用におけるHfqの役割を解明する上で重要な手掛かりとなる。
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Research Products
(11 results)
