2009 Fiscal Year Annual Research Report
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21247030
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
岸本 健雄 東京工業大学, 大学院・生命理工学研究科, 教授 (00124222)
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| Keywords | 細胞周期 / 卵細胞 / MPF / サイクリンB-Ccdc2 / Greatwallキナーゼ |
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| Research Abstract |
MPF(maturation/M phase-promoting factor、卵成熟/M期促進因子)は真核細胞に普遍的なM期誘起因子であり、cyclin B-Cdc2複合体(Cdc2と略記)と同義であるとされている。しかしヒトデ卵においては、除核した場合、Cdc2は正常に活性化するにもかかわらず、MPF活性は検出されない。このMPFとCdc2との不一致が何に起因するのか、つまり、Cdc2以外に、核(卵核胞、GV)由来でMPFに必須の因子(GV因子)の分子本体を突きとめることをめざした。
(1)Plk1、Aurora、MAPKについて、これらのM期キナーゼの活性を抑制してもMPF活性が検出できる(その卵細胞質を未成熟卵に移植し、被注射卵でGVBDが起こるかを検定する;MPF assayと省略)ことを示し、MPFの要素としては必要でないことを明らかにした。
(2)ヒトデのGreatwall kinase(Gwl)のcDNAをクロン化し、抗体を作成して解析した結果、ヒトデ卵においては、GwlはGV中に局在し、M期開始に際してCdc2の下流で活性化すると判明した。
(3)Gwlの組換えタンパク質を作製し、ヒトデ除核卵に注入してからM期の開始を誘起すると、MPF assayにおいてMPF活性は回復して検出されるようになった。
(4)Gwlの活性中和抗体を作製し、それを正常にGVをもつヒトデ卵に注入してからM期の開始を誘起すると、MPF assayにおいてMPF活性は検出できなかった。以上の結果は、Gwlが「GV因子」として必要かつ十分であることを示しており、「MPF=Cdc2+Gwl」という結論に至った。
以上の結果は、Gwlが「GV因子」として必要かつ十分であることを示しており、「MPF=Cdc2+Gwl」という結論に至った。
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