2009 Fiscal Year Annual Research Report
家畜感染症制御を目指すファージセラピーの実践的試み
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21360399
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
丹治 保典 Tokyo Institute of Technology, 大学院・生命理工学研究科, 教授 (00282848)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
宮永 一彦 東京工業大学, 大学院・生命理工学研究科, 助教 (40323810)
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| Keywords | バクテリオファージ / 乳房炎 / 黄色ブドウ球菌 / ファージセラピー / 耐性菌 / 下水流入水 |
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| Research Abstract |
酪農学園大学から提供された乳房炎罹患牛乳汁45検体から約50のS.aureusをスクリーニングし、PCR法により分類したところ、15種に分類できた。分類したS.aureusを用いて都市下水流入水から15種のファージをスクリーニングした。スクリーニングしたS.aureusとファージを用い、各ファージのホストレンジを解析した.ファージの溶菌活性により、透明なプラーク、懸濁したプラーク、より懸濁したプラーク、プラーク形成能を持たないものに分類した。スクリーニングされた15種のファージの中で、φSA012およびφSA039と命名したファージは他のファージよりも感染宿主域が広く、非常に透明なプラークを形成したことから以後の実験に用いた。φSA012およびφSA039をCsC1を用いた超遠心法により精製し、透過型電子顕微鏡(TEM)により観察した。両ファージともにT-偶数系ファージと類似な頭殻とテールファイバー、伸縮性のシースを持つことからMyoviridae属に分類できることが判明した。
SA003のファージによる溶菌特性を解析した。ファージを添加した直後は溶菌に伴うS.aureusの断片化により、A_<600>の値は急減した。しかし、培養を継続するとファージに対する耐性能を獲得したS.aureusの出現により再びA_<600>の上昇が認められた。A_<600>が再上昇はφSA012の方がφSA039を加えた時より長時間を要した。一方、両ファージの混合液を加えた系では実験時間内に耐性菌の出現に伴うA_<600>の上昇は認められなかった。宿主の耐性化機構が異なる複数のファージ混液(ファージカクテル)を用いることで、耐性菌出現を抑制できると考えられた。
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