2009 Fiscal Year Annual Research Report
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21360400
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
本多 裕之 名古屋大学, 工学研究科, 教授 (70209328)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大河内 美奈 名古屋大学, 工学研究科, 准教授 (70313301)
加藤 竜司 名古屋大学, 工学研究科, 助教 (50377884)
式田 光宏 名古屋大学, 工学研究科, 准教授 (80273291)
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| Keywords | 磁性微粒子 / 細胞アレイ / 1細胞解析 / パターニング / 微細加工 |
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| Research Abstract |
細胞組織や異種細胞との相互作用に基づく1細胞解析を目標に、磁気細胞パターニング法を用いた細胞の形態・運動などの表現型変化の検出、イメージングと顕微鏡観測等による1細胞分析方法の基盤技術の確立のため、以下の研究を実施した。
1)簡便な磁気ラベル化法の開発:1細胞の効率的な機能解析を実行するために、磁性微粒子を混和して短時間で磁気ラベルできる簡単な導入方法を検討した。様々な細胞種で検討したところ、細胞数に関わらず、培地中でもトリプシン処理中でも、10μg/mlの濃度になるようにMCLをただ添加するのみで、すぐに1,000個程度の少量の細胞に対して十分な磁気誘導効果が得られることを見出した。この結果を学術誌に発表した。
2)マイクロ磁場制御技術の開発:すでに開発している磁化ピンホルダー(磁気剣山)デバイスを改良してプラットフォームの大きさや形状を変え、悪性黒色腫(メラノーマ)のアレイ状配置に成功した。また細胞をマトリゲル状に播種しコラーゲンゲルで埋包することで、3次元細胞浸潤評価アレイを構築し、5種類のメラノーマの浸潤能力の違いを明らかにした。
3)ペプチド修飾表面での細胞の種類の識別:これまでに探索した細胞接着ペプチドを元にして配列置換を実施し細胞接着を評価した。その結果、PRYDおよびGKKGペプチドのインテグリンの種類が違うことが明語らかになった。細胞特異的ペプチドの候補になると示唆される。また、この2種類のペプチドを混合させ血管内皮細胞の形態を観察したところ、血管新生阻害能を発揮することがわかった。
4)磁気細胞パターニングによる1細胞機能計測:2)で検討した細胞パターニング法を使い、細胞の浸潤を蛍光顕微鏡と画像解析で検出した。共焦点レーザー顕微鏡で深さ方向への浸潤能力が評価できることを明らかにし、画像解析により経時的かつ定量的に浸潤評価できることを示した。
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