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2011 Fiscal Year Annual Research Report

中心子前駆体構造の構築機構の解明

Research Project

Project/Area Number 21370088
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

広野 雅文  東京大学, 理学(系)研究科(研究院), 准教授 (10212177)

Keywords微小管 / 細胞骨格 / クラミドモナス / 基底小体
Research Abstract

中心体の中核構造である中心子は9本のトリプレット微小管が9回対称に配置した円筒状構造をもつ。中心子の9回対称性構造は真核生物に広く保存されており、原生生物からヒトに至るまでほとんど変わらない。我々は以前に、この9回対称性が乱れるクラミドモナス突然変異株bld12を単離・解析し、1)中心子形成過程で最初に現れる9回対称性構造であるカートホイールが中心子微小管形成の足場として機能すること、2)カートホイールの中心部分はSAS-6という蛋白質から構成されていること、を明らかにした。
本研究ではこれまでに、SAS-6の結晶構造解析により1)SAS-6が2つの球状の頭部とコイルドコイル構造をとる棒状の尾部からなる2量体を形成すること、2)頭部が疎水性結合を介して9対称に会合することによってカートホイールを構成すること、を明らかにした。
今年度は、カートホイールにおけるSAS-6の機能をさらに追求するため、我々が以前に同定したカートホイール構成タンパク質、Bld10pとの相互作用を検討した。SAS-6のいくつかの断片を大腸菌で発現させ、組換えBld10pとの結合性を免疫沈降法で解析した。その結果、SAS-6のコイルドコイル領域を一部含む、C末端領域がBld10pと直接結合することが判明した。この結果は、SAS-6がカートホイール周辺部分にC末端を向けて配置し、Bld10pがその領域に局在すること、というこれまでの知見と良く一致する。この結合を阻害する変異を導入したSAS-6は中心子形成に機能できないことから、SAS-6とBld10pの直接結合が中心子形成に極めて重要であることが初めて明らかになった。

Current Status of Research Progress
Reason

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (4 results)

All 2013 2012

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (2 results) (of which Invited: 1 results)

  • [Journal Article] The MIA complex is a conserved and novel dynein regulator essential for normal ciliary motility2013

    • Author(s)
      Yamamoto,R. et al.
    • Journal Title

      J.Cell Biol.

      Volume: 201 Pages: 263-278

    • DOI

      10.1083/jcb.201211048

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The role of retrograde intraflagellar transport in flagellar assembly and function.2012

    • Author(s)
      Engel, B. D. et al.
    • Journal Title

      J.Cell Biol.

      Volume: 199 Pages: 151-167

    • DOI

      10.1083/jcb.201206068

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Novel features in the formation and function of the “9+2” axoneme revealed by a basal-body-deficient mutant of Chlamydomonas2012

    • Author(s)
      Hirono, M
    • Organizer
      Symposium " Structural biology of flagella/cilia/centriole"
    • Place of Presentation
      Paul Scherrer Institute, Switzerland
    • Year and Date
      20120619-20120620
    • Invited
  • [Presentation] Direct interaction between SAS-6 and Bld10p, the two known cartwheel components that establish the ninefold symmetry of the centriole2012

    • Author(s)
      Hirono, M
    • Organizer
      日本細胞生物学会
    • Place of Presentation
      神戸、神戸国際会議場
    • Year and Date
      20120528-20120530

URL: 

Published: 2014-07-24  

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