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2011 Fiscal Year Annual Research Report

メタサイクロジェネシス関連ベクターパラサイト相互作用の分子機構に関する研究

Research Project

Project/Area Number 21380186
Research InstitutionObihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine

Principal Investigator

井上 昇  帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (10271751)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 河津 信一郎  帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (60312295)
後藤 康之  東京大学, 農学生命科学研究科, 准教授 (50553434)
Keywordsアフリカトリパノソーマ / ライフサイクル / 細胞分化 / 遺伝子 / 転写翻訳制御 / ツェツェバエ
Research Abstract

本年度は昨年度までに我々が同定したトリパノソーマ・エピマスティゴート型(EMF)ステージ特異的表面タンパク質をコードする遺伝子(cesp)の原虫発育時期特異的発現調節メカニズムを明らかにする目的で研究を実施した。EMFは他の発育ステージとは異なり、接着依存性に増殖する点がユニークである。EMFの細胞接着は哺乳類感染型原虫への分化に必須であるため、本研究の成果は接着を阻止して原虫の伝播を防ぐ新規感染予防法開発に発展する可能性がある。まず始めにcespの転写を核run-on assayで解析した結果、α-アマニチン感受性RNA polymerase IIによって転写されていることを明らかにした。次にcespのEMF特異的発現調節機構を明らかにするために、そのmRNA 3'UTRに着目した。cespの3'UTRをeGFP遺伝子と組合せた発現コンストラクトを作製し、トリパノソーマのゲノムに挿入してmRNAおよび蛋白質の発現量を各発育ステージで比較した。その結果cesp 3'UTRを組合せたeGFPの発現はEMFステージ特異的であった。以上の結果からcesp 3'UTRにはEMFステージ特異的遺伝子発現を制御するcis-elementが存在すること明らかとなった。そこでコアとなるcis-elementを同定するため、作製したeGFP発現カセットの一部の配列を欠損させたdeletion mutantを作製し、eGFPの発現をステージ間で比較した。その結果、AUに富むコアcis-element配列を同定し、さらにcis-elementに特異的に結合するEMF細胞質由来RNA結合蛋白質の存在をRNAゲルシフトアッセイで証明した。 これら一連の成果はアフリカトリパノソーマEMF特異的遺伝子発現調節機構を明らかにした初めての報告である (Suganumaら, MBP, 2012)。

Current Status of Research Progress
Reason

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (5 results)

All 2013 2012

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] アフリカトリパノソーマの遺伝子発現調節機構2013

    • Author(s)
      菅沼啓輔、井上昇
    • Journal Title

      獣医寄生虫学会誌

      Volume: 11 Pages: 87-92

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The epimastigote stage-specific gene expression of CESP is tightly regulated by its 3 ' UTR2012

    • Author(s)
      Keisuke Suganuma
    • Journal Title

      MOLECULAR AND BIOCHEMICAL PARASITOLOGY

      Volume: 186 Pages: 77-80

    • DOI

      10.1016/j.molbiopara.2012.09.010

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Trypanosoma congolense EMF特異的遺伝子cespの発現調節領域の特定2013

    • Author(s)
      菅沼啓輔
    • Organizer
      第20回分子寄生虫ワークショップ
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      20130826-29
  • [Presentation] Analysis of the cis-element for gene expression regulation in congolense epimastigote specific protein (CESP)2013

    • Author(s)
      Keisuke Suganuma
    • Organizer
      The 24th International Conference of the World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology
    • Place of Presentation
      パース、オーストラリア
    • Year and Date
      20130825-20130829
  • [Presentation] Trypanosoma congolense EMFステージ特異的遺伝子の発現調節機構2013

    • Author(s)
      菅沼啓輔
    • Organizer
      第155回日本獣医学会学術集会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      20130328-30

URL: 

Published: 2014-07-24  

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