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2009 Fiscal Year Annual Research Report

アクアポリン4の蛋白複合体とアレイ構造による機能制御に関する研究

Research Project

Project/Area Number 21390061
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

安井 正人  Keio University, 医学部, 教授 (90246637)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 中尾 和貴  独立行政法人理化学研究所, 動物実験支援ユニット, ユニットリーダー (20217657)
Keywordsアクアポリン / 蛋白複合体 / 構造機能相関 / 水分子 / 脳浮腫
Research Abstract

1.AQP4 M1アイソフォーム特異的ノックアウトマウス
相同組換えクローン2ラインからそれぞれキメラマウスを作製し、C57BL/6の雌と交配し、F1世代にノックアウトアリルのヘテロ個体がいる事をサザンブロット法及びPCR法により確認した。得られたF1マウスはの一部は、C57BL/6を遺伝的背景に持つF1pリコンビナーゼ、あるいはCreリコンビナーゼのトランスジエニックマウスと交配する事でPGK-neo-pAカセット、めるいはlacZ/PGK-neo-pAカセットの除去を行った。それぞれの遺伝子型についてC57BL/6に対し戻し交配を行うとともに一部ホモ個体を作製し、AQP4タンパク質の発現をウェスタンブロット法により確認したところ、lacZ/PGK-neo-pAカセットを有したホモ個はAQP4のnullマウスである事が分かった。一方、PGK-neo-pAカセットのみを除去したマウス、lacZ/PGK-neo-pAカセットを除去したマウスのホモ個体ではAQP4M23アイソフォームのみの発現は確認できたが、総発現量は野生型より低かった。
2.AQP4完全ノックアウトマウス
M1特異的ノックアウトマウスと同様に、キメラマウスを作製後、C57BL/6の雌と交配し、F1世代にノックアウトアリルのヘテロ個体がいる事を確認した。得られたF1マワスの一部は、C57BL/6を遺伝的背景に持つF1pリコンビナーゼ、あるいはCreリコンビナーゼのトランスジェニックマウスと交配する事でPGK-neoカセット、あるいはEGFP/PGK-neoカセットの除去を行った。それぞれの遺伝子型についてC57BL/6に対し戻し交配を行うとともに一部ホモ個体を作製し、AQP4タンパク質の発現をウェスタンブロット法により確認したところ、いずれの遺伝子型においてもAQP4タンパク質の消失が確認できた。

  • Research Products

    (21 results)

All 2010 2009 Other

All Journal Article (13 results) (of which Peer Reviewed: 13 results) Presentation (7 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Regulation of water permeability through aquaporin-42010

    • Author(s)
      Yukutake, Y., Yasui, M.
    • Journal Title

      Neuroscience (Epub ahead of print)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Molecular Mechanisms How Mercury Inhibits Water Permeation of Aquaporin-1 : Understanding by Molecular Dynamics Simulation2010

    • Author(s)
      Hirano Y, Okimoto N, Yasuoka K, Taiji M, Suematsu M, Yasui M
    • Journal Title

      Biophys.J. (in press)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Expression and distribution of tight junction proteins in human amnion during late pregnancy2010

    • Author(s)
      Kobayashi, K., Kadohira, I., Tanaka, M., Yoshimura, Y., Ikeda, K., Yasui, M.
    • Journal Title

      Placenta 31

      Pages: 158-162

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Regulation of Kv2.1 phosphorylation in an animal model of anoxia2010

    • Author(s)
      Ito T, Nuriya M, Yasui M.
    • Journal Title

      Neurobiol.Dis. 38

      Pages: 85-91

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Activity-dependent regulation of HCN1 protein in cortical neurons2009

    • Author(s)
      Arimitsu T, Nuriya M, Ikeda K, Takahashi T, Yasui M
    • Journal Title

      Biochem.Biophys.Res.Commun. 387

      Pages: 87-91

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Drosophila big brain does not act as a water channel, but mediates cell adhesion2009

    • Author(s)
      Tatsumi K, Tsuji S, Miwa H, Morisaku T, Nuriya M, Orihara M, Kaneko K, Okano H, Yasui M.
    • Journal Title

      FEBS Lett. 583

      Pages: 2077-2082

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] TSHR Mutations as a Cause of Congenital Hypothyroidism in Japan : a Population-Based Genetic Epidemiology Study2009

    • Author(s)
      Narumi S, Muroya K, Abe Y, Yasui M, Asakura Y, Adachi M, Hasegawa T
    • Journal Title

      J.Clin.Endocrinol.Metab. 94

      Pages: 1317-1323

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Rapid and reversible inhibition of aquaporin-4 by zinc2009

    • Author(s)
      Yukutake Y, Hirano Y, Suematsu M, Yasui M
    • Journal Title

      Biochem. 48

      Pages: 12059-12061

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Dynamic changes in amniotic tight junctions during pregnancy2009

    • Author(s)
      Kobayashi, K., Inai, T., Shibata, Y., Yasui, M
    • Journal Title

      Placenta 30

      Pages: 840-847

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] pH regulated anion permeability of aquaporin-62009

    • Author(s)
      Yasui, M.
    • Journal Title

      Handb.Exp.Pharmacol. 190

      Pages: 299-308

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Aquaporin 6 binds calmodulin in a calcium-dependent manner2009

    • Author(s)
      Rabaud, N.E., Song, L., Wang, Y., Agre, P., Yasui, M., Carbrey, J.M.
    • Journal Title

      Biochem.Biophys.Res.Commun. 383

      Pages: 54-57

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Aquaporin-6 is expressed along the rat gastrointestinal tract and upregulated by feeding in the small intestine2009

    • Author(s)
      Laforenza, U., Gastaldi, G., Polimeni, M., Tritto, S., Tosco, M., Ventura, U., Scaffino, M.F., Yasui, M.
    • Journal Title

      BMC Physiol. 9

      Pages: 1-12

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Membrane potential dynamics of axons in cultured hippocampal neurons probed by second harmonic generation imaging2009

    • Author(s)
      Nuriya M, Yasui M.
    • Journal Title

      Journal of Biomedical Optics (in press)

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Aquaporin and Water Seen by Two Photon Microscopy2009

    • Author(s)
      安井正人
    • Organizer
      WINPTech2009 Workshop on Information, Nano and Photonics Technology 2009
    • Place of Presentation
      KOBE University Centennial Hall and Takikawa Memorial Hall, Kobe University, Kobe, Japan
    • Year and Date
      2009-12-02
  • [Presentation] アクアポリン-4の調節機構2009

    • Author(s)
      安井正人
    • Organizer
      第39回慶應ニューロサイエンス研究会『アクアポリン-4と神経疾患-新たな病態メカニズムの展開と治療への戦略』
    • Place of Presentation
      慶應義塾大学医学部 北里講堂
    • Year and Date
      2009-10-31
  • [Presentation] Clinical relevance of water channel, aquaporin2009

    • Author(s)
      安井正人
    • Organizer
      The First International Meeting on Japan-China-Korea Traditional Medicine
    • Place of Presentation
      昭和薬科大学記念講堂(講義棟2F)
    • Year and Date
      2009-10-25
  • [Presentation] Aquaporins in brain disorders2009

    • Author(s)
      安井 正人
    • Organizer
      北京大学医学部
    • Place of Presentation
      北京大学
    • Year and Date
      2009-09-16
  • [Presentation] Regulation, structure, and function of brain aquaporins2009

    • Author(s)
      安井正人
    • Organizer
      The 22nd Biennial Joint Meeting of the International Society for Neurochemistry(ISN)and the Asian Pacific Society for Neurochemistry(APSN), Busan, Korea
    • Place of Presentation
      BEXCO, Busan, Korea
    • Year and Date
      2009-08-24
  • [Presentation] 水代謝の生理と病態に関する最新の話題-アクアポリンの構造機能相関と分子標的創薬2009

    • Author(s)
      安井正人
    • Organizer
      第44回日本小児腎臓病学会学術集会
    • Place of Presentation
      一橋記念講堂
    • Year and Date
      2009-06-26
  • [Presentation] 中枢神経におけるアクアポリン-4(AQP4)の役割2009

    • Author(s)
      安井 正人
    • Organizer
      第50回日本神経学会総会
    • Place of Presentation
      仙台国際センター
    • Year and Date
      2009-05-22
  • [Remarks] 薬理学教室HP

    • URL

      http://web.sc.itc.keio.ac.jp/pharm/index-jp.html

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Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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