2009 Fiscal Year Annual Research Report
受容体結合蛋白によるエンドセリンA型およびB型受容体発現レベル調節と病態的意義
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21390068
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
三輪 聡一 Hokkaido University, 大学院・医学研究科, 教授 (40157706)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西屋 禎 北海道大学, 大学院・医学研究科, 講師 (80399831)
堀之内 孝広 北海道大学, 大学院・医学研究科, 助教 (20307771)
西本 新 北海道大学, 大学院・医学研究科, 助教 (90396325)
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| Keywords | 酵母ツーハイブリッド法 / エンドセリン受容体 / Jab1 / 細胞内移行 / 蛋白質分解 / リン酸化 / ユビキチン化 |
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| Research Abstract |
我々は、酵母ツーハイブリッド法を用いて成人ヒト心臓cDNAライブラリーから新規エンドリンA型受容体C末端領域(ET_AR C-tail)結合蛋白質としてJab1を単離・同定した。Jab1はET_ARCのユビキチン化、リソソームでの蛋白質分解を亢進させてET_ARレベルを調節していることを明らかにした。さらに、アゴニストであるET-1でET_ARを刺激するとアゴニスト誘導性の蛋白質分解が引き起こされ、ET_ARレベルは時間依存的に減少していく一方,ET_ARに結合しているJab1量が増加すること、またET_ARより代謝回転が速いエンドセリンB型受容体(ET_BR)では、ET_ARに比べて、ユビキチン化が亢進しているとともに、より多くのJab1と結合していることを明らかにした。これらの結果より、Jab1のET受容体への結合量がET受容体のユビキチン化レベルを変動させ、ET受容体の蛋白質分解速度を制御し、その結果、ET受容体レベルが変動することが明らかになった(Nishimoto A.et al., Biochem Biophys Res Commun., 391, p1616-22, 2010)。ET受容体などのG蛋白質共役型受容体(GPCR)の細胞内移行及び蛋白質分解には、GPCRのリン酸化及びユビキチン化が関与していることが知られている。ET受容体の分解におけるリン酸化とユビキチン化の役割を明らかにするためにET受容体、C-tailに存在するセリン、スレオニンをアラニンに変異させたリン酸化されない変異ET受容体及びリジンをアラニンに変異させたコビキチン化されない変異ET受容体を作製しな。現在、これらの変異ET受容体を用いて、Jab1のET受容体への結合、ET受容の細胞内移行、ET受容体のユビキチン化レベル、ET受容体の蛋白質分解速度、ET受容体レベルがどのように変化するか検討している。
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Research Products
(17 results)
