2011 Fiscal Year Annual Research Report
PKCの機能破綻により発症する神経変性疾患モデル動物作製と解析および創薬への応用
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21390070
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
齋藤 尚亮 神戸大学, 自然科学系先端融合研究環・バイオシグナル研究センター, 教授 (60178499)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上山 健彦 神戸大学, 自然科学系先端融合研究環・バイオシグナル研究センター, 准教授 (80346254)
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| Keywords | プロテインキナーゼC / 脊髄小脳変性症 / 神経変性 / カルシウム / 遺伝子変異 / アミロイド |
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| Research Abstract |
本研究ではPKCγの機能破綻による2つの疾患(1)小脳脊髄変性症、(2)パーキンソン病に焦点を当て、1)これら疾患発症におけるPKCγの役割、発症メカニズムを明らかにするとともに、2)(1)(2)疾患のモデルマウスを作製し、さらには治療薬の新しい標的を見出すことを目的として行った。
本年度は、(1)SCA14モデルマウスとして、変異型PKCγをレンチウイルスを用いて、小脳に感染させたマウスを作製することを試みた。小脳失調症状、プルキンエ細胞脱落などの病理的所見は見られなかったが、プルキンエ細胞内およびその樹状突起内に凝集体を観察した。このような凝集体を電子顕微鏡で観察したところ、アミロイド繊維様の凝集を形成していることが明らかとなった。また、変異型PKCγを精製し、37度にて放置するとthiofiavin染色でも電子顕微鏡観察でも、アミロイド様線維を形成したことなどからも、SCA14の発症に、変異型PKCγのアミロイド形成が関与することが示された。さらに、in vitroで、PKCγの凝集体形成には、PKCγ分子内のC1domainとkinase domainの結合が、関与することを示した。これらの所見は、治療薬の標的を見出す観点において非常に重要と考えられた。
(2)PKCγノックアウトマウスが、パーキンソン病モデルマウスとなりうることを報告した。また、PKCγの機能低下がパーキンソン病発症に関与するメカニズムを明らかにするために、リン酸化プロテオーム解析を行った。その結果、10種類のPKCγ基質蛋白質を同定し、そのリン酸化部位、ドパミン遊離に与える影響などを調べ、これらの蛋白質のリン酸化が、パーキンソン病治療薬の標的となる可能性を検討した。
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[Journal Article] Establishment of a Novel Fluorescence-Based Method to Evaluate Chaperone-Mediated Autophagy in a Single Neuron2012
Author(s)
Seki, T., Yoshino, K., Tanaka, S., Dohi, E., Onji, T., Yamamoto, K., Hide, I., Paulson, H.L., Saito, N., Sakai, N.
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Journal Title
PLoS ONE
Volume: 7
Pages: e31232
Peer Reviewed
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[Journal Article] c-Abl tyrosine kinase regulates serum-induced nuclear export of diacylglycerol kinase α by phosphorylation at Tyr2182012
Author(s)
Matsubara, T., Ikeda, M., Kiso, Y., Sakuma, M., Yoshino, K-I., Sakane, F., Merida, I., Saito, N., Shirai, Y.
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Journal Title
J.Biol.Chem.
Volume: 287
Pages: 5507-5517
Peer Reviewed
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[Journal Article] Elucidation of the Molecular Mechanism and Exploration of Novel Therapeutics for Spinocerebellar Ataxia Caused by Mutant Protein Kinase Cγ2011
Author(s)
Seki, T., Adachi, N., Abe-Seki, N., Shimahara, T., Takahashi, H., Yamamoto, K., Saito, N. and Sakai, N.
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Journal Title
J Pharmacol Sci
Volume: 116
Pages: 239-247
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[Journal Article] Cooperation of p40phox with p47phox for Nox2 activation during Fc{lower case gamma} R-mediated phagocytosis--Mechanism for acquisition of p40phox PI(3)P binding--2011
Author(s)
Ueyama, T., Nakakita, J., Kobayashi, T., Kobayashi, T.,-hyun Son, J-h., Sakaguchi, H., Leto, T., Saito, N.
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Journal Title
J.Biol.Chem.
Volume: 286
Pages: 40693-40705
Peer Reviewed
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[Journal Article] Streptococcus mutans diacylglycerol kinase homologue : a potential target for anti-caries chemotherapy2011
Author(s)
Shibata, Y., Kawada-Matsuo, M., Shirai, Y, Saito, N., Li.D., Yamashita, Y.
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Journal Title
J.Med.Microbiol.
Volume: 60
Pages: 625-630
Peer Reviewed
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[Journal Article] Direct binding of RalA to PKCη and its crucial role in morphological change during keratinocytes differentiation2011
Author(s)
Shirai, Y., Morioka, S., Sakuma, M., Yoshino, K., Otsuji, C., Sakai, N., Kashiwagi, K., Chida, K., Shirakawa, R., Horiuchi, H., Nishigori, C., Ueyama, T., Saito, N.
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Journal Title
Mol.Biol.Cell
Volume: 22
Pages: 1340-1352
Peer Reviewed
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[Journal Article] Nuclear Choline Acetyltransferase Activates Transcription of a High-affinity Choline Transporter2011
Author(s)
Matsuo, A., Bellier, J-P, Nishimura, M., Yasuhara, O., Saito, N., Kimura, H.
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Journal Title
J.Biol.Chem.
Volume: 286
Pages: 5836-5845
Peer Reviewed
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[Presentation] Novel phosphorylation site(s) of cofilin by PKCα and its negative role in the degranulation from RBL-2H3 mast cells2011
Author(s)
Sakuma, M., Shirai, Y., Yoshino K., Kuramasu, M., Nakamura, T., Mizuno, K., Hide, I., Nakata, Y., Saito, N.
Organizer
The American society for cell biology
Place of Presentation
デンバー、米国
Year and Date
20111203-20111207
