2011 Fiscal Year Annual Research Report
iPS細胞と点変異修復技術を融合させたアミロイドニューロパチーの肝細胞置換療法
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21390270
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
安東 由喜雄 熊本大学, 生命科学研究部, 教授 (20253742)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
城野 博史 熊本大学, 生命科学研究部, 講師 (40515483)
植田 光晴 熊本大学, 生命科学研究部, 助教 (60452885)
粂 昭苑 熊本大学, 発生医学研究所, 教授 (70347011)
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| Keywords | iPS細胞 / アミロイドーシス / FAP / トランスサイレチン / 遺伝子治療 / 肝細胞 / 線維芽細胞 |
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| Research Abstract |
家族性アミロイドポリニューロパチー(FAP)では、肝移植が現在唯一の治療手段となっているが、これにはいくつかの問題点がある。そこでFAP患者(FAP ATTR V30M, ATTR Y114C)の皮膚から採取した線維芽細胞をiPS細胞化し、FAPの肝細胞置換療法の可能性の検討ならびに細胞レベルでFAPの病態解析を行った。本年の研究結果から、FAP患者から樹立したiPS細胞は、健常人由来のiPS細胞と同様の肝細胞分化パターンを示すことが明らかとなり、本細胞が肝細胞への分化能を有していることが判明した。また、肝細胞の分化過程において、既知の肝細胞マーカー(アルブミンなど)の発現に比べTTRの発現はごく早期から認められ、肝細胞への分化後、異型TTRがmRNAレベルで発現していることが確認された。本細胞はヘテロ接合体のFAP患者から採取した細胞であるため、これをアテロコラーゲンで包埋したsingle stranded oligonucleotides (SSOs)で遺伝子変換を行ったところ、低率ながらも遺伝子変換が認められ、iPS細胞の安定培養法の確立後、SSOsおよびsiRNA TTRなどの核酸を対象に様々な遺伝子導入法を用いた導入効率の改善を行った。さらに、マウスを用いたiPS細胞の移植実験を行い、細胞数は少ないながらも肝臓への生着が確認できた。本年度の結果から、FAP患者由来のiPS細胞を安定的に肝細胞に分化させることが可能となり、遺伝子変換および細胞置換も低率ながら可能になったことから、これらの系を用いて、肝細胞置換療法に向けて、確かな展望が開ける状況が得られた。今後は、本細胞を用いた異型TTRの細胞内挙動・アミロイド形成能の解析と共に(これまでの異型TTRの高発現細胞株はホモの異型TTRを産生する細胞であるため、ヘテロ接合体のFAP患者から採取した本細胞は実際の患者で起こるアミロイド形成機構を解析するツールとして価値がある)、遺伝子変換効率の向上、我々が開発したトランスジェニックラットを用いたin vivoの肝細胞置換療法研究に移る予定である。
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[Journal Article] Cyclodextrin, a novel therapeutic tool for suppressing amyloidogenic transthyretin misfolding in transthyretin-related amyloidosis2011
Author(s)
Jono H, Anno T, Motoyama K, Misumi Y, Tasaki T, Oshima T, Mori Y, Mizuguchi M, Ueda M, Shono M, Obayashi K, Arima H, Ando Y
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Journal Title
Biochem J
Volume: 437
Pages: 35-42
Peer Reviewed
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[Journal Article] Amyloid neuropathy in a younger domino liver-transplanted recipient2011
Author(s)
Obayashi K, Yamashita T, Tasaki M, Ueda M, Shono M, Jono H, Ohshima T, Ohya Y, Asonuma K, Inomata Y, Ando Y
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Journal Title
Muscle Nerve
Volume: 43
Pages: 449-450
Peer Reviewed
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[Journal Article] Spinal multifocal amyloidosis derived from wild-type transthyretin2011
Author(s)
Sueyoshi T, Ueda M, Sei A, Misumi Y, Oshima T, Yamashita T, Obayashi K, Shinriki S, Jono H, Shono M, Ando Y, Mizuta H
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Journal Title
Amyloid
Volume: 18
Pages: 165-168
Peer Reviewed
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