2011 Fiscal Year Annual Research Report
下垂体腺腫におけるmiRNA発現とmRNAの制御に関する研究
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21390414
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| Research Institution | Nippon Medical School |
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Principal Investigator |
寺本 明 日本医科大学, 大学院・医学研究科, 教授 (50133070)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉田 大蔵 日本医科大学, 医学部, 准教授 (30210701)
金 景成 日本医科大学, 医学部, 助教 (30339387)
太組 一朗 日本医科大学, 医学部, 講師 (60307923)
山口 文雄 日本医科大学, 医学部, 講師 (70267219)
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| Keywords | miRNA / mRNA / 下垂体腺腫 / cDNA microarray / real-time RT-PCR / rno-miR-101b |
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| Research Abstract |
<諸言>今回我々は下垂体腺腫細胞におけるPRL発現に関与するmiRNAのsignal cascadeを検討した。
<方法>下垂体腺腫細胞GH3とrat normal pituitary cell(RPC)のmRNAとmiRNAの発現プロファイリングをcDNA microarrayで解析し、有意に負の相関のあるものの中から、PRL産生に関与する遺伝子を選択した。それらのmiRNAの3側非翻訳領域に相補的な塩基配列を構築してGH3細胞のmiRNAをノックダウンし、PRL分泌変化をELISAで定量し、同時にシグナル下流域をcDNA microarrayで解析した。
<結果>RPCよりもGH3で過剰発現していたmiRNAのうちPRLに関しては、rno-miR-101bと-191,-194の発現過剰がみられた。PRL産生はrno-miR-101bのノックダウンしたGH3細胞にのみにPRL分泌が有意に増加した。cDNA microarrayでもPRL産生に関するシグナルは有意にup-regulateしていた。さらに今年度はrno-miR-101bをGH3細胞に強制発現させたらPRL,PRL receptorは発現が低下していた。さらに180例の下垂体腺腫の手術サンプルではin situ hybridizationを行い発現量を検討したが、PRL産生腫瘍に特異的に発現抑制をみた。この事実は我々が行ったPRL産生に関するrno-miR-101bのPRL産生に果たす役割を示唆していた。
<結論>GH3ではRPCに比して種々のmiRNAの発現変化がみられるが、このうちrno-miR-101はPRL発現を抑制する機能を有していると思われた。このmiRNAに対する分子標的療法は将来のPRL産生腫瘍に対する治療法として可能性が高いと思われた。
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