2009 Fiscal Year Annual Research Report
分子進化学から探る酸性リン蛋白質による生体内石灰化機構の解明
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21390491
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
豊澤 悟 Osaka University, 大学院・歯学研究科, 教授 (30243249)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中野 貴由 大阪大学, 工学研究科, 教授 (30243182)
佐伯 万騎男 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 講師 (30273692)
佐藤 淳 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 講師 (70335660)
岸野 万伸 大阪大学, 大学院・歯学研究科, 助教 (60346161)
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| Keywords | DMP1 / カゼインキナーゼ / 石灰化 / リン酸化 / 骨形成 |
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| Research Abstract |
骨の非コラーゲン性酸性リン蛋白質であるdentin matrix protein 1 (DMPI)は、生体内で強力なマイナス荷電体となり、強いCa^<2+>結合能を介して骨の石灰化に関与すると考えられているが、その石灰化機構の詳細は明らかではない。我々は、「機能にとって重要な分子の性質や部位は長い進化過程において変化しない」という分子の進化学的性質から、DMP1分子の機能に重要と考えられるアミノ酸配列の特徴を見出した。その1つは、カゼインキナーゼ(CK)によるリン酸化配列であり、CKによるリン酸化はDMP1分子の機能に重要であると考える。
本研究では、骨組織に特異的なCKアイソフォームを同定するため、マウス骨組織からレーザーマイクロダイセクション法により骨膜と骨を選択的に採取して、RNA抽出後、cDNAを作製した。CKのアイソフォームを幅広く検討するため、degenerateプライマーを用いてCKのアイソフォームを検討したところ、CK2の発現率が高いと考えられる結果を得た。また、骨芽細胞株でCK1およびCK2発現をリアルタイムPCRにて検討したところ、分化過程の石灰化時期に一致して、CK1とCK2の両者の発現が上昇することが分かった。
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Research Products
(2 results)
