2009 Fiscal Year Annual Research Report
外科系インプラントとしてのスカフォールドフリー3次元再生軟骨の開発
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21390532
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
星 和人 The University of Tokyo, 医学部附属病院, 特任准教授 (30344451)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高戸 毅 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (90171454)
飯野 光喜 山形大学, 医学部, 教授 (50212717)
森 良之 東京大学, 医学部附属病院, 准教授 (70251296)
藤原 夕子 東京大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任助教 (50466744)
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| Keywords | 再生軟骨 / インプラント / スカフォールド / 顎顔面 / 軟骨細胞 |
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| Research Abstract |
厳密な3次元形状の維持を必要とする口腔外科領域への再生軟骨の応用法を確立することを目的とし、再生軟骨ペレットを三次元的に癒合させてスカフォールドフリーの再生軟骨を作製し、かつ、再生軟骨が移植後に吸収されないように母床組織の組織張力を調節する手術手技を確立する。初年度である本年度では、1)軟骨細胞を用いたペレット形成条件、ならびに2)アガロースキャストによるペレット癒合条件、の検討をおこなった。
1)では、培養軟骨細胞を3mm間隔グリッド付温度応答性ポリマーコート培養皿に播種した後、低温処理(20℃)にて3x3mmの細胞シートを大量に作製し、基質産生促進培養液で静置培養することにより大量のペレットを入手する方法と、培養軟骨細胞を酵素処理にて回収し、20万細胞ずつチューブに分注し、同培養液で培養することにより大量のペレットを入手する方法を比較した。前者は酵素処理をしないため、分泌された細胞外基質を最大限活用することによりペレットを大量に作製することが出来たが、ペレットの大きさの不均一であり、個数や体積を一定にして実験を行うのには不向きであった。それに対し、酵素処理法では、ペレットの大きさが一定になり、実験としてペレット癒合条件などを検討するには、後者のほうが妥当であろうと思われた。2)においては、アガロースの使用条件を検討し、アガロースの硬さや物質拡散性などの点から、アガロースの濃度を確定した。同濃度のアガロースをもちいて、1x1x1cmの陥凹を有するアガロースキャストを作製し、1)項で設定した軟骨細胞ペレットを投与し、癒合のための加圧条件を検討した。さらに、同条件で作製した癒合ペレット(再生軟骨)をヌードマウスに移植し、2ヵ月後摘出して評価したところ、プロテオグリカンを豊富に含む再生軟骨を観察し、同条件がペレット癒合には妥当であることを確認した。
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