2011 Fiscal Year Annual Research Report
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21570200
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| Research Institution | Ehime University |
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Principal Investigator |
関藤 孝之 愛媛大学, 農学部, 助教 (20419857)
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| Keywords | 液胞 / アミノ酸トランスポーター / VBAファミリー / AVTファミリー |
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| Research Abstract |
1、新規液胞アミノ酸トランスポーター同定に向け、機能未知トランスポーターにGFPを付加し、細胞内局在を解析した結果、新たに3種の液胞膜局在性トランスポーターを同定した。2、前年度同定された液胞膜局在性トランスポーターについてアミノ酸輸送活性の有無をより直接的に評価するため、単離液胞膜小胞を用いて放射ラベルしたアミノ酸の取り込みおよび排出活性を調べた。その結果、過剰発現および遺伝子破壊によってアミノ酸輸送活性が変化するものを数種見出した。3、中性アミノ酸全般を液胞内へと輸送するトランスポーターの基質特異性について再検討を行い、塩基性アミノ酸であるヒスチジンも液胞内に取り込むことを示唆する結果を得た。4、液胞外へアミノ酸を排出するトランスポーターAvt4について、N末端親水性領域に依存した漬性調節機構の存在を明らかにした。5、出芽酵母に発現させた酵母液胞アミノ酸トランスポーターの植物ホモログが液胞膜に局在し、液胞アミノ酸トランスポーター欠損を機能的に相補することを明らかにした。6、分裂酵母Avtトランスポーターホモログの細胞内局在およびアミノ酸輸送活性を解析し、これらが出芽酵母同様、液胞膜を介したアミノ酸輸送に機能することを示す結果を得た。7、分裂酵母Vbaホモログを出芽酵母に発現させ液胞膜小胞を用いたアミノ酸輸送実験を行なった結果、出芽酵母Vbaと同様に液胞への塩基性アミノ酸取り込みに機能する一方、中性アミノ酸も取り込むことが示唆された。
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