2010 Fiscal Year Annual Research Report
アフリカツメガエル卵受精におけるウロプラキン複合体の生理機能の解析
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21570225
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
深見 泰夫 神戸大学, 自然科学系先端融合研究環遺伝子実験センター, 教授 (00156746)
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| Keywords | 受精 / 細胞膜マイクロドメイン / Srcチロシンキナーゼ / PI3キナーゼ / Ca^<2+>イオン上昇 |
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| Research Abstract |
アフリカツメガエル(ゼノパス)卵の細胞膜マイクロドメイン(ラフト)に局在し、受精時に必須の役割を果たしているゼノパスSrcチロシンキナーゼ(xSrc)の活性化メカニズムを明らかにするため、卵ラフトに局在しているいくつかのシグナル伝達タンパク質について、特異的阻害剤を用いた解析を行った。その結果、ホスファチジルイノシトール3キナーゼ(PI3キナーゼ)の阻害剤であるLY294002によって、xSrcの活性化、卵内Ca^<2+>イオンの上昇、マップキナーゼの脱リン酸化、サイクリンB2とMosキナーゼの分解、などの受精ならびに卵活性化シグナルが阻害されることを見いだした。また、受精時にPI3キナーゼの85kDaサブユニットが卵ラフトへ局在変化することや、PI3キナーゼの下流因子とされているAktキナーゼが活性化されていることが明らかになった。これらの結果は受精に伴ってPI3キナーゼの活性化が起こっていることを示している。しかしながら、xSrcによるPI3キナーゼのチロシンリン酸化は見られず、xSrcの下流でPI3キナーゼが活性化されているという証拠は得られなかった。逆に、PI3キナーゼの産物であるホスファチジルイノシトール(3,4,5)三リン酸(PIP_3)によってxSrcが活性化されること、PIP_3の脱リン酸化を行うPTENホスファターゼの阻害剤であるbp(V)により卵の人為的活性化が起こることが見いだされた。これらの結果は、受精のシグナル伝達において、PI3キナーゼがその産物であるPIP_3を通じてxSrcを正に制御している因子である可能性を示唆している。
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[Journal Article] Characterization of lipovitellin 2 as a tyrosine-phosphorylated protein in oocytes, eggs and early embryos of Xenopus laevis.2011
Author(s)
Kushima, S., Gunay, M., Hasan, A.K.M.M., Fukami, Y., Sato, K
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Journal Title
Peer Reviewed
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