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2011 Fiscal Year Annual Research Report

糸状菌の形態形成・分化を制御する糖転移酵素群の機能同定

Research Project

Project/Area Number 21580096
Research InstitutionKyushu University

Principal Investigator

後藤 正利  九州大学, 大学院・農学研究院, 准教授 (90274521)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 竹川 薫  九州大学, 大学院・農学研究院, 教授 (50197282)
二神 泰基  九州大学, 大学院・農学研究院, 助教 (60512027)
Keywords糸状菌 / O-結合型糖鎖 / 糖転移酵素 / Aspergillus
Research Abstract

本研究では、糸状菌Aspergillus nidulansを対象としてO-結合型糖鎖伸長に関与する糖転移酵素を同定し、その機能を明らかにすることを目的する。A.nidulansのα-mannosyltransferaseをコードすると推定されるmntA、mntB、mntC遺伝子を出芽酵母のα-1,2-mannosyltransferase (kre2、ktr1、tr3)3重破壊株に導入した。さらにO-結合型糖鎖が高度に付加されることが知られているキチナーゼ遺伝子(CTS1)を上記の3種のmnt発現酵母菌へ導入した。その結果、3種のmnt発現株とmnt非導入株とて生産されたCTS1pの糖鎖付加量に相違がなかった。次にA.nidulansのmnt破壊株に、O-結合型糖鎖が高度に付加されることが知られているA.awamoriグルコアミラーゼ遺伝子(glaA)を導入した。各mnt破壊株と野生株で生産されたGlaAとで分子量に差はなかった。以上の結果から、A.nidulansの3種のMntはO-結合型糖鎖修飾には関与していない可能性が示唆された。
ついで、A.nidulansの野生株及び各mnt破壊株から細胞壁糖鎖(ガラクトマンナン)が付加した糖タンパク質を抽出し、β-1,5-ガラクトフラノースを認識する抗体を用いたイムノブロットを行った。細胞壁のガラクトフラナンはα-1,2-結合したマンナン主鎖の非還元末端付近で分岐状に付加している。野生株由来の細胞壁タンパク質からは抗体と反応するシグナルを得たが、mntA及びmntC破壊株ではシグナルは完全に消失し、mntB破壊株ではシグナル強度が著しく減少した。以上の結果から、mntはAspergillus属糸状菌に独特な細胞壁のガラクトマンナンのマンナン部分の合成に関与していることが示唆された。

  • Research Products

    (5 results)

All 2012 2011 Other

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Putative cell wall integrity sensor proteins in Aspergillus nidulans2012

    • Author(s)
      Futagami, T., Goto, M
    • Journal Title

      Communicative & Integrative Biology

      Volume: 5 Pages: 1-3

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Putative stress sensors WscA and WscB are involved in hypo-osmotic and acidic pH stress in Aspergillus nidulans2011

    • Author(s)
      Futagami, T., et al
    • Journal Title

      Eukaryotic Cell

      Volume: 10 Pages: 1504-1515

    • DOI

      10.1128/EC.05080-11

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 麹菌のポストゲノム研究の展開:糸状菌に特異な機能未知遺伝子を探る2011

    • Author(s)
      後藤正利、岩下和裕
    • Journal Title

      日本生物工学会誌

      Volume: 89 Pages: 310-312

  • [Presentation] Quest for the genes encoding O-glycosylated proteins that are responsible for the maintenance of cell morphology in Aspergillus nidulans2011

    • Author(s)
      M.Goto, K.Seto, T.Futagami, Y.Kajiwara, H.Takashita, T.Omori, K.Takegawa.
    • Organizer
      IUMS Congresses
    • Place of Presentation
      Sapporo Convention Center, Sapporo, Japan
    • Year and Date
      2011-09-09
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.brs.kyushu-u.ac.jp/~fcmic/

URL: 

Published: 2013-06-26  

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