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2011 Fiscal Year Final Research Report

Evaluation of cDNA synthesis and RNA amplification with highly efficient reverse transcriptases and expansion of their use

Research Project

  • PDF
Project/Area Number 21580110
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Research Field Applied biochemistry
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

YASUKAWA Kiyoshi  京都大学, 大学院・農学研究科, 准教授 (30397559)

Project Period (FY) 2009 – 2011
Keywords酵素利用学
Research Abstract

We generated highly thermostable reverse transcriptases from Moloney murine leukemia virus and avian myeloblastosis virus(E286R/E302K/L435R/D524A and V238R/L388R/D450A, respectively) by site-directed mutagenesis. It is suggested that introduction of positive charges into reverse transcriptases at positions that have been implicated in the interaction with T/P is effective to stabilize reverse transcriptases.

  • Research Products

    (28 results)

All 2012 2011 2010 2009 Other

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 4 results) Presentation (17 results) Book (1 results) Remarks (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (3 results) (of which Overseas: 1 results)

  • [Journal Article] Comparison of the thermal stabilities of theαβheterodimer and theαsubunit of avian myeloblastosis virus reverse transcriptase2011

    • Author(s)
      Konishi, A., Nemoto, D., Yasukawa, K., and Inouye, K.
    • Journal Title

      Biosci. Biotechnol. Biochem

      Volume: Vol 75 Pages: 1618-1620

    • DOI

      10.1271/bbb.110238

  • [Journal Article] Increase in thermal stability of Moloney murine leukaemia virus reverse transcriptase by site-directed mutagenesis2010

    • Author(s)
      Yasukawa, K., Mizuno, M., Konishi, A., and Inouye, K.
    • Journal Title

      J. Biotechnol

      Volume: Vol 150 Pages: 299-306

    • DOI

      10.1016/j.jbiotec.2010.09.961

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Effects of organic solvents on the reverse transcription reaction catalyzed by reverse transcriptases from avian myeloblastosis virus and Moloney murine leukaemia virus2010

    • Author(s)
      Yasukawa K., Konishi, A., and Inouye, K.
    • Journal Title

      Biosci. Biotechnol. Biochem

      Volume: Vol 74 Pages: 1925-1930

    • DOI

      10.1271/bbb.100337

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Detection of cesA mRNA from Bacillus cereus by RNA-specific amplification2010

    • Author(s)
      Yasukawa, K., Agata, N., and Inouye, K.
    • Journal Title

      Enzyme Microb. Technol

      Volume: Vol 46 Pages: 391-396

    • DOI

      10.1016/j.enzmictec.2009.12.009

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Insight into the mechanism of the stabilization of Moloney murine leukaemia virus reverse transcriptase by eliminating RNase H activity2010

    • Author(s)
      Mizuno, M., Yasukawa, K., and Inouye, K.
    • Journal Title

      Biosci. Biotechnol. Biochem

      Volume: Vol 74 Pages: 440-442

    • DOI

      10.1271/bbb.90777

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Improving the thermal stability of avian myeloblastosis virus reverse transcriptaseαsubunit by site-directed mutagenesis

    • Author(s)
      Konishi, A., Yasukawa, K., and Inouye, K.
    • Journal Title

      Biotechnol. Lett

      Volume: (in press)

    • DOI

      doi:10.1007/s10529-012-0904-9

  • [Presentation] 組換えHIV-1逆転写酵素の調製と性状解析2012

    • Author(s)
      保川清、篠村まゆ、井上國世
    • Organizer
      2012年度日本農芸化学会大会
    • Place of Presentation
      京都女子大学
    • Year and Date
      2012-03-23
  • [Presentation] 部位特異的変異導入によるAMV逆転写酵素αサブユニットの熱安定性の向上2012

    • Author(s)
      小西篤、保川清、井上國世
    • Organizer
      2012年度日本農芸化学会大会
    • Place of Presentation
      京都女子大学
    • Year and Date
      2012-03-23
  • [Presentation] 部位特異的変異によるMMLV逆転写酵素の熱安定性の向上2011

    • Author(s)
      小西篤、根本大資、保川清、井上國世
    • Organizer
      2011年度日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      東京農工大学小金井キャンパス
    • Year and Date
      2011-09-27
  • [Presentation] Comparison of the thermal stabilities of theαβheterodimer andαsubunit of avian myeloblastosis virus reverse transcriptase2011

    • Author(s)
      小西篤、根本大資、保川清、井上國世
    • Organizer
      2011年度日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      国立京都国際会館
    • Year and Date
      2011-09-23
  • [Presentation] 部位特異的変異による耐熱性MMLV逆転写酵素の作製2011

    • Author(s)
      小西篤、水野匡貴、保川清、井上國世
    • Organizer
      2011年度日本生化学会近畿支部例会
    • Place of Presentation
      関西医科大学
    • Year and Date
      2011-05-21
  • [Presentation] タンパク質工学による逆転写酵素の耐熱化(シンポジウム:タンパク質工学による耐熱化酵素創製の新しい戦略)2011

    • Author(s)
      保川清
    • Organizer
      2011年度日本農芸化学会大会
    • Place of Presentation
      京都女子大学
    • Year and Date
      2011-03-28
  • [Presentation] 昆虫細胞で発現させた組換えAMV逆転写酵素αサブユニットの精製と性状解析2011

    • Author(s)
      保川清、根本大資、井上國世
    • Organizer
      2011年度日本農芸化学会大会
    • Place of Presentation
      京都女子大学
    • Year and Date
      2011-03-26
  • [Presentation] 部位特異的変異導入によるMMLV逆転写酵素の熱安定性の向上2011

    • Author(s)
      小西篤、水野匡貴、保川清、井上國世
    • Organizer
      2011年度日本農芸化学会大会
    • Place of Presentation
      京都女子大学
    • Year and Date
      2011-03-26
  • [Presentation] Effects of organic solvents on the reverse transcription reaction catalyzed by reverse transcriptases from avian myeloblastosis virus and Moloney murine leukaemia virus2010

    • Author(s)
      保川清、小西篤、井上國世
    • Organizer
      BMB2010
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド
    • Year and Date
      2010-12-07
  • [Presentation] AMV逆転写酵素とMMLV逆転写酵素による逆転写反応に対する有機溶媒の効果2010

    • Author(s)
      保川清、小西篤、井上國世
    • Organizer
      2010年度日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      フェニックス・シーガイア・リゾート(宮崎市)
    • Year and Date
      2010-10-29
  • [Presentation] AMVおよびMMLV逆転写酵素による逆転写反応に対する有機溶媒の効果2010

    • Author(s)
      保川清、小西篤、井上國世
    • Organizer
      2010年度日本農芸化学会関西支部大会
    • Place of Presentation
      近畿大学農学部
    • Year and Date
      2010-10-03
  • [Presentation] 逆転写反応に対する溶媒の効果2010

    • Author(s)
      保川清、小西篤、井上國世
    • Organizer
      2010年度日本農芸化学会大会
    • Place of Presentation
      東京大学駒場キャンパス
    • Year and Date
      2010-03-29
  • [Presentation] RNase H活性を消失させることによるモロニーマウス白血病ウイルス逆転写酵素(MMLV RT)の安定化の解析2010

    • Author(s)
      水野匡貴、保川清、井上國世
    • Organizer
      2010年度日本農芸化学会大会
    • Place of Presentation
      東京大学駒場キャンパス
    • Year and Date
      2010-03-29
  • [Presentation] 部位特異的変異によるMMLV逆転写酵素の活性と熱安定性の向上2009

    • Author(s)
      水野匡貴、保川清、井上國世
    • Organizer
      2009年度日本農芸化学会関西・中四国・西日本支部日本栄養・食糧学会九州・沖縄支部日本食品科学工学会西日本支部合同沖縄大会
    • Place of Presentation
      琉球大学千原キャンパス
    • Year and Date
      2009-10-31
  • [Presentation] A MMLV/AMVキメラ逆転写酵素の性質決定2009

    • Author(s)
      水野匡貴、保川清、井上國世
    • Organizer
      2009年度日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      神戸国際会議場
    • Year and Date
      2009-10-23
  • [Presentation] AMV逆転写酵素とMMLV逆転写酵素の熱安定性に対する鋳型プライマーの効果2009

    • Author(s)
      保川清、根本大資、井上國世
    • Organizer
      2009年度日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      名古屋大学東山キャンパス
    • Year and Date
      2009-09-24
  • [Presentation] MMLV/AMVキメラ逆転写酵素の酵素化学的性質の決定2009

    • Author(s)
      水野匡貴、保川清、井上國世
    • Organizer
      2009年度日本生化学会近畿支部例会
    • Place of Presentation
      大阪医科大学本部キャンパス
    • Year and Date
      2009-07-18
  • [Book] 核酸増幅法.産業酵素の応用技術と最新動向2009

    • Author(s)
      保川清
    • Total Pages
      194-202
    • Publisher
      シーエムシー出版、東京
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.enzchem.kais.kyoto-u.ac.jp/

  • [Patent(Industrial Property Rights)] 変異型逆転写酵素2012

    • Inventor(s)
      保川清、小西篤、井上國世
    • Industrial Property Rights Holder
      京都大学
    • Industrial Property Number
      特許、特願2012-30848
    • Filing Date
      2012-02-15
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 変異型逆転写酵素2011

    • Inventor(s)
      保川清、井上國世
    • Industrial Property Rights Holder
      京都大学
    • Industrial Property Number
      特許、PCT/JP2011/68157
    • Filing Date
      2011-08-09
    • Overseas
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 変異型逆転写酵素、それをコードする核酸、変異型逆転写酵素の製造方法、核酸関連酵素の熱安定性の向上方法、逆転写方法、逆転写反応キットおよび検査キット2010

    • Inventor(s)
      保川清、井上國世
    • Industrial Property Rights Holder
      京都大学
    • Industrial Property Number
      特許、特願2010-181471
    • Filing Date
      2010-08-13

URL: 

Published: 2013-07-31  

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