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2011 Fiscal Year Annual Research Report

魚類造血機構の解明

Research Project

Project/Area Number 21580236
Research InstitutionNihon University

Principal Investigator

森友 忠昭  日本大学, 生物資源科学部, 准教授 (20239677)

Keywordsコイ / 赤血球造血 / エリスロポイエチン / キットリガンド / 魚類 / 造血
Research Abstract

ErythropoieinおよびKit ligand添加コロニーアッセイによるコイ赤血球前駆細胞の同定
コイEpoおよびKit LのcDNAを発現ベクターpET-16bにそれぞれ連結し、大腸菌へ形質転換後、組換えタンパク質をNiアフィニティークロマトグラフィーにより精製した。コイの腎臓を始めとする各造血組織から造血細胞を回収し、それらを前述の組換え造血因子を添加した0,8%メチルセルロース半固形培地に播種し、培養を行った。
結果:Epo存在下において腎臓造血細胞は大小2種類のコロニーを形成し、コロニー形成数はEpo濃度に依存した。大小2種類のコロニーはいずれも赤血球マーカー遺伝子を発現したことから、これらのコロニーは異なる分化段階の赤血球前駆細胞に由来すると考えられた。以上より、魚類においてもEpo依存性の赤血球造血が行われていることが明らかとなった。続いて、哺乳類では幹細胞因子とも呼ばれ、Epoと相乗的に赤血球前駆細胞の増殖を促すことが知られるKit Lのコイ腎臓造血細胞に対する効果について検討した。Kit L単独刺激ではコロニー形成はほとんど認められなかったが、Kit LとEpoの共刺激時には、Epo単独刺激時と比較してコロニー数が約4~5倍に増加した。形成されたコロニーはEpo単独刺激時に見られた大小2種類の赤血球コロニーに加え、第3のコロニーが認められた。このコロニーは赤血球マーカー遺伝子に加え、哺乳類の血小板に相当する栓球のマーカー遺伝子を発現していたことから、赤血球と栓球の共通前駆細胞に由来するコロニーであることが示唆された。以上より、Kit LはEpoとの併用により、赤血球前駆細胞に対する相乗効果を示すことが明らかとなり、さらに栓球系細胞に対する交叉活性を示すと考えられた。
以上本培養系により、コイにおいて2種類の赤血球前駆細胞および赤血球と栓球の共通前駆細胞の存在が示唆された。

  • Research Products

    (12 results)

All 2012 2011

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (6 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Hematopoietic cell populations in dolphin bone marrow : Analysis of colony formation and differentiation2011

    • Author(s)
      Segawa, T., Itou, T., Suzuki, M., Moritomo, T., Nakanishi, T., and Sakai, T
    • Journal Title

      Results in Immunology

      Volume: 1 Pages: 1-5

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Antiviral Protection Mechanisms Mediated by Ginbuna Crucian Carp Interferon Gamma (Ifn_Y) Isoforms 1 and 2 Through Two Distinct Ifn_Y-Receptors2011

    • Author(s)
      Yabu T, Toda H, Shibasaki Y, Araki K, Yamashita M, Anzai H, et al
    • Journal Title

      Journal of Biochemistry

      Volume: 150 Pages: 635-648

    • DOI

      10.1093/jb/mvr108

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Evaluating antigen-specific cytotoxicity of CD8+ T cells in fish by Granzyme B-like activity2011

    • Author(s)
      Toda H, Yabu T, Shiba H, Moritomo T, Nakanishi T
    • Journal Title

      Veterinary Immunology and Immunopathology

      Volume: 141 Pages: 168-172

    • DOI

      10.1016/j.vetimm.2011.02.020

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Conservation of characteristics and functions of CD4 positive lymphocytes in a teleost fish2011

    • Author(s)
      Toda H, Saito Y, Koike T, Takizawa F, Araki K, Yabu T, et al
    • Journal Title

      Developmental & Comparative Immunology

      Volume: 35 Pages: 650-660

    • DOI

      10.1016/j.dci.2011.01.013

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Perforin-dependent cytotoxic mechanism in killing by CD8 positive T cells in ginbuna crucian carp, Carassius auratus langsdorfii2011

    • Author(s)
      Toda H, Araki K, Moritomo T, Nakanishi T
    • Journal Title

      Developmental & Comparative Immunology

      Volume: 35 Pages: 88-93

    • DOI

      10.1016/j.dci.2010.08.010

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] ギンブナCD3ε分子の特性解明2011

    • Author(s)
      村田憲史、大橋健、柴崎康宏, 藪健史, 森友忠昭、中西照幸
    • Organizer
      日本比較免疫学会
    • Place of Presentation
      海洋研究開発機構
    • Year and Date
      2011-08-21
  • [Presentation] 魚類の造血機構解明を目的としたコイkit ligand Aの機能解析2011

    • Author(s)
      尻無浜由希、片倉文彦、藪健史、森友忠昭、中西照幸
    • Organizer
      日本比較免疫学会
    • Place of Presentation
      海洋研究開発機構
    • Year and Date
      2011-08-21
  • [Presentation] ギンブナの移植片対宿主反応におけるCD8陽性T細胞の動態2011

    • Author(s)
      田中洋枝、柴崎康宏、藪健史、森友忠昭、中西照幸
    • Organizer
      日本比較免疫学会
    • Place of Presentation
      海洋研究開発機構
    • Year and Date
      2011-08-21
  • [Presentation] コイTPOの遺伝子クローニングおよび性状解析2011

    • Author(s)
      林潔高、片倉文彦、藪健史、森友忠昭、中西照幸
    • Organizer
      日本比較免疫学会
    • Place of Presentation
      海洋研究開発機構
    • Year and Date
      2011-08-21
  • [Presentation] In vitroにおけるコイCD4+T細胞のクローン性増殖2011

    • Author(s)
      山口卓哉、片倉文彦、森友忠昭、中西照幸
    • Organizer
      日本生体防御学会
    • Place of Presentation
      那覇市ぶんかテンブス館テンブスホール
    • Year and Date
      2011-06-29
  • [Presentation] Clonal growth of Carp (Cyprinus carpio) helper T-cells2011

    • Author(s)
      Tadaaki Moritomo
    • Organizer
      2012 Taiwan-Japan Symposium on Emerging Trends in Aquatic Animal Immunity and Aquaculture Biotechnology
    • Place of Presentation
      National Cheng Kung University
    • Year and Date
      2011-02-21
  • [Book] 魚病学2012

    • Author(s)
      児玉洋・川本恵子・森友忠昭・和田新平
    • Total Pages
      150
    • Publisher
      緑書房

URL: 

Published: 2013-06-26  

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