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2009 Fiscal Year Annual Research Report

バンド3タンパク質の膜内領域の構造解析

Research Project

Project/Area Number 21590322
Research InstitutionNagasaki International University

Principal Investigator

濱崎 直孝  Nagasaki International University, 薬学部, 教授 (00091265)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 隈 博幸  長崎国際大学, 薬学部, 講師 (40435136)
Keywords生体分子医学 / バンド3タンパク質 / 膜貫通領域
Research Abstract

本研究の最終目的は、赤血球膜バンド3タンパク質が媒介する陰イオン透過の分子機序解明である。本年度(平成21年度)は、電子線ならびにX線を用いてバンド3タンパク質の膜内構造解析を試みるため、高純度・高濃度なバンド3タンパク質の精製条件の検討を行った。その結果、非常に高純度な精製タンパク質を得ることができた。
この精製標品を、連携研究者である理化学研究所平井研究室、京都大学岩田研究室にて二次元および三次元結晶構造解析に用いた結果、二次元結晶も三次元結晶もそれぞれの解析に耐えうる結晶が日常的に得られるようになった。なかでも二次元結晶解析では、当初はチューブ状の結晶で18Åの分解能で解析でき、その結果60×110×70Åのダイマー構造が得られ、J.Struct.Biol.(169:406-412,2010)に発表した。さらに改良の結果、7.5Åの分解能で立体構造を解析することができた(J.Mol.Biol., 397:179-189,2010)。その結果、驚くことに、バンド3の高次構造はすでに立体構造が明らかなCIC型塩素イオンチャンネルの構造と類似していることが明らかとなった。この類似性から、イオン輸送体の構造と機能解析、イオン輸送機構の進化の観点において重要な知見を得ることが可能となり、これまで報告者らが行ってきたタンパク質化学的実験結果を加味しながら、さらなる解析を進行中である。
さらに、三次元結晶構造解析に耐えうる質の高い結晶もできつつあり、二次元構造解析と並行してプロジェクトを進行中である。

  • Research Products

    (5 results)

All 2010 2009 Other

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Book (1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Helical image reconstruction of the outward-open human erythrocyte band 3 membrane domain in tubular crystals2010

    • Author(s)
      Yamaguchi T, et al.
    • Journal Title

      J.Struct.Biol. 169

      Pages: 406-412

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Structure of the Membrane Domain of Human Erythrocyte Anion Exchanger 1 Revealed by Electron Crystallography2010

    • Author(s)
      Yamaguchi T, et al.
    • Journal Title

      J.Mol.Biol. 397

      Pages: 179-189

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Mutation of His 834 in human anion exchanger 1 affects substrate binding2010

    • Author(s)
      Takazaki S, et al.
    • Journal Title

      Biochim. Biophys. Acta 1798

      Pages: 903-908

    • Peer Reviewed
  • [Book] Quality of Diagnostic Samples (3rd Edition)2009

    • Author(s)
      Hamasaki N, et al.
    • Total Pages
      124
    • Publisher
      German United Society for Clinical Chemistry and Laboratory Medicine
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.riken.jp/r-world/info/release/press/2010/100122/detail.html

URL: 

Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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