2009 Fiscal Year Annual Research Report
三重特異性抗体を用いた進行肝細胞癌に対する治療法の確立
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21590853
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
佐々木 茂 Sapporo Medical University, 医学部, 講師 (10305229)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山本 博幸 札幌医科大学, 医学部, 講師 (40332910)
今井 浩三 札幌医科大学, 学長 (60117603)
篠村 恭久 札幌医科大学, 医学部, 教授 (90162619)
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| Keywords | 癌 / 肝癌 / 抗体治療 / 分子改変 |
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| Research Abstract |
進行肝細胞癌に対して、理想的な治療薬としての抗体医薬の開発を目的に本研究を行っている。
これまでヒト肝癌細胞において、Interferon(IFN)α/β投与によりfibroblast growth factor receptor-1(以下FGFR-1)の過剰発現が生じることを明らかにしてきた。これをふまえ、FGFR-1に対するモノクローナル抗体(以下MoAb)を独自に作成し、IFNα/βと併用し、in vitroおよびin vivoにおいて、著明な抗癌効果を明らかにしてきた。本研究では、さらにより強力な抗癌効果を発揮するように、このMoAbに分子改変を加え、抗FGFR-1および抗CD3の機能を有し、さらにFcを結合させた三重特異性抗体を確立し、臨床試験を行いたいと考えている。
平成21年度は以下の研究を進めた。
1) すでに作製したマウス抗FGFR-1抗体発現HybridomaからmRNAを抽出し、5'RACE法を用いて重鎖可変領域(V_H)と軽鎖可変領域(V_L)のDNA塩基配列を取得した。
2) 取得したV_HおよびV_LのCDRのDNA塩基配列を所定の制限酵素サイトを付加したプライマーにてPCR法により増幅させた後にすでに確立した三重特異性抗体動物細胞発現用ベクターに組み込んだ。一方のベクターにはヒト免疫グロブリンγ1定常領域cDNAと抗ヒトCD3モノクローナル抗体であるOKT3由来ヒト化V_L配列も組み込まれており、このベクターに抗FGFR-1抗体由来のヒト化V_Hを組み込んだ。もう一方にはヒト免疫グロブリンkappa定常領域cDNAとOKT3由来ヒト化V_Hが組み込まれており、このベクターに抗FGFR-1抗体由来のヒト化V_Lを組み込んだ。
現在、構築した2つのベクターを動物細胞にて共発現させて安定的に抗体が得られるかの検討を行っている。
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