C型肝炎ウイルス複製複合体に含まれる蛋白の同定とウイルス複製における役割の解析

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21590867
• Research Institution: National Institute of Infectious Diseases
• Principal Investigator: 相崎 英樹 National Institute of Infectious Diseases, ウイルス第二部, 主任研究官 (00333360)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 鈴木 哲朗 国立感染症研究所, 室長 (00250184)
• Keywords: ウイルス / 感染症 / 癌 / 内科 / プロテオーム

Research Abstract

本研究はプロテオミックス技術により、HCV複製複合体(RC)を構成する宿主因子を同定し、その機能を解析することを目的とした。サブゲノムレプリコン(genotype 1b)を有するHuh7細胞からHCVRCを含む界面活性剤不溶性膜分画を抽出し、Huh7細胞と比較したところ、レプリコン細胞で2倍以上量が増加していた蛋白が約60個認められ、それらはHeat shock protein、Chaperone、Enzyme、Receptor signaling complex、Ubiquitin proteasome system proteinなどに分類された。に更に、HCVRNA複製活性は細胞の増殖期に亢進することが知られているので、レプリコン細胞の膜分画において対数増殖期にのみ増加した蛋白を同定したところ、高HCV複製期に1.5倍以上増加していた蛋白が約45個認められた。両者に共通する蛋白として、分子シャペロンT-complex polypeptide 1 ring complex subunitε(CCT5)及びHeat shock cognate protein 70が含まれていた。レプリコン細胞へのCCT5 siRNA導入によってHCV RNA複製レベルが低下したことから、今回同定された分子シャペロンがHCV RCへ取り込まれRNA複製調節に関与する可能性が示唆された。今後、CCT5、HSD70のウイルス複製における役割について解析する予定である。

Research Products

• [Journal Article] Identification of hepatitis C virus genotype 2a replicon variants with reduced susceptibility to ribavirin (2010)
  • Author(s): Hmwe SS, Aizaki H, Date T, Murakami K, Ishii K, Miyamura T, Koike K, Wakita T, Suzuki T
  • Journal Title: Antiviral Res. 85 Pages: 520-524
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] SYNCRIP(synaptotagmin-binding, cytoplasmic RNA-interacting protein)is a host factor involved in hepatitis C virus RNA replication (2009)
  • Author(s): Liu HM, Aizaki H, Choi KS, Machida K, Ou JJ, Lai MM
  • Journal Title: Virology 386 Pages: 249-256
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Involvement of creatine kinase B in hepatitis C virus genome replication through interaction with the viral NS4A protein (2009)
  • Author(s): Hara H, Aizaki H, Matsuda M, Shinkai-Ouchi F, Inoue Y, Murakami K, Shoji I, Kawakami H, Matsuura Y, Lai MM, Miyamura T, Wakita T, Suzuki T
  • Journal Title: J Virol. 83 Pages: 5137-5147
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Proteomics analysis of mitochondrial proteins reveals over expression of a mitochondrial protein chaperone, prohibitin, in cells expressing hepatitis C virus core protein (2009)
  • Author(s): Tsutsumi T, Matsuda M, Aizaki H, Moriya K, Miyoshi H, Fujie H, Shintani Y, Yotsuyanagi H, Miyamura T, Suzuki T, Koike K
  • Journal Title: Hepatology 50 Pages: 378-386
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Evaluation of Hepatitis C Virus Core Antigen Assays in Detecting the Recombinant Viral Antigens of Various Genotypes (2009)
  • Author(s): Mohsan S, Suzuki R, Kondo M, Aizaki H, Kato T, Mizuochi T, Wakita T, Watanabe H, Suzuki T
  • Journal Title: J Clin Microbiol. 47 Pages: 4141-4143
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Production of infectious hepatitis C virus by using RNA polymerase I-mediated transcription
  • Author(s): Masaki T, Suzuki R, Saeed M, Mori KI, Matsuda M, Aizaki H, Ishii K, Maki N, Miyamura T, Matsuura Y, Wakita T, Suzuki T
  • Journal Title: J Virol (In press)
  • Peer Reviewed
• [Presentation] C型肝炎ウイルス subgenomic replicon RNAを複製するヒト肝星細胞株の樹立 (2009)
  • Author(s): 渡辺則幸、相崎英樹、松浦知和、脇田隆字、鈴木哲朗
  • Organizer: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20091025-20091027
• [Presentation] Identification of lipid droplet -associated membrane proteins that are involved in HCV production (2009)
  • Author(s): Aizaki H, Yamamoto M, Goto K, Fukasawa M, Hanada K, Sato S, Takahashi N, Matsuura Y, Miyamura T, Wakita T, Suzuki T
  • Organizer: 16th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • Place of Presentation: Nice, France
  • Year and Date: 20091003-20091009
• [Presentation] Structural requirements of virion-associated cholesterol for HCV morphogenesis and infectivity (2009)
  • Author(s): Yamamoto M, Aizaki H, Goto K, Hamano K, Miyamura T, Wakita T, Suzuki T
  • Organizer: 16th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • Place of Presentation: Nice, France
  • Year and Date: 20091003-20091009
• [Presentation] HCV subgenomic replicon replication in human hepatic stellate cell lines (2009)
  • Author(s): 渡辺則幸, 相崎英樹, 松浦善治, 脇田隆字, 鈴木哲朗
  • Organizer: 16th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • Place of Presentation: Nice, France
  • Year and Date: 20091003-20091009
• [Presentation] 感染性HCV粒子形成における宿主生体膜の役割 (2009)
  • Author(s): 相崎英樹、脇田隆字
  • Organizer: 第45回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 20090604-20090605
• [Presentation] 生体膜脂質のC型肝炎ウイルス生活環における役割 (2009)
  • Author(s): 相崎英樹
  • Organizer: 第31回日本膜学会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20090521-20090522
• [Presentation] HCV粒子形成に関与する脂肪滴周辺膜蛋白の同定と機能解析 (2009)
  • Author(s): 相崎英樹、後藤耕司、山本真民、佐藤慈子、高橋信弘、深澤征義、花田賢太郎、松浦善治、宮村達男、脇田隆字、鈴木哲朗
  • Organizer: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20090000
• [Presentation] C型肝炎ウイルス粒子形成、感染性に重要なコレステロール構造の解析 (2009)
  • Author(s): 山本真民、相崎英樹、宮村達男、濱野国勝、脇田隆字、鈴木哲朗
  • Organizer: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20090000
• [Presentation] C型肝炎ウイルス粒子の脂質成分の感染における役割 (2009)
  • Author(s): 相崎英樹、山本真民、後藤耕司、原弘道、森川賢一、谷英樹、松浦善治、斎藤恭子、深澤征義、花田賢太郎、西島正弘、宮村達男、脇田隆字、鈴木哲朗
  • Organizer: 第16回肝細胞研究会
  • Place of Presentation: 山形
  • Year and Date: 20090000
• [Book] 生体膜脂質のC型肝炎ウイルス生活環における役割 (2009)
  • Author(s): 相崎英樹
  • Total Pages: 6
  • Publisher: 日本膜学会誌
• [Remarks]
  • URL: http://www.nih.go.jp/niid/vir2/HP_top0729/top.html