2010 Fiscal Year Annual Research Report
新規昇圧物質カップリングファクター6による血管傷害性の評価と創薬への活用
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21590946
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
長内 智宏 弘前大学, 大学院・医学研究科, 准教授 (00169278)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
奥村 謙 弘前大学, 大学院・医学研究科, 教授 (20185549)
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| Keywords | Coupling factor 6 / Vascular smooth muscle cells / Acidosis / Calcium / c-Src / Angiotensin II |
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| Research Abstract |
Coupling factor 6(CF6)の細胞内情報伝達機構とCF6抗体の阻害効果
方法:1)VSMC:高血圧自然発症ラット(SHR)と正常血圧ラット(WKY)の腸間膜動脈ならびにA7r5を使用した。2)結合アッセイ、ATPase活性、細胞内pH,Ca濃度、c-Src活性化の測定をおこなった。結果:1)Competitive displacement analysisより求めたCF6受容体のKd値はSHRがWKYに比較して小であった。2)ATPase活性は、CF6 10^<-7>M投与により上昇し、SHRがWKYに比較して大であった。3)細胞内pHはCF6 10^<-7>M投与により低下し、その低下はSHRがWKYに比較して大であった。4)c-SrcはCF6 10^<-7>M投与によりtyrosine残基がリン酸化され、その反応はSHRがWKYに比較して2倍大であった。5)A7r5細胞にCF6 10^<-7>Mを添加すると、細胞内遊離Ca濃度の上昇が認められ、nifedipine投与により完全に抑制された。Angiotensin II(AngII)10^<-7>Mによる細胞内遊離Ca濃度の上昇はCF6 10^<-7>M前投与により増強され、その程度はSHRがWKYに比較して大であった(412±26 vs 162±14nM,p<0.05)。CF6によるCa influxとAngII依存性Ca濃度上昇の増強作用はc-Src阻害薬PP1の前投与により消失した。6)これらの作用はすべてCF6C端に対す抗体で阻害された。
結論:CF6はVSMCの表面に存在するATP合成酵素のβ-subunitと結合し、ATPをADPに分解することにより、細胞内への水素イオンのinfluxを亢進させた。CF6はc-Srcの活性化を介して、Ca influx AngII依存性Ca濃度上昇の亢進作用を示した。これらの反応はSHRで亢進しており、CF6の高血圧への関与が示唆された。この作用にはCF6のC末端側が関与することが明らかとなった。
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[Journal Article] Overexpression of coupling factor 6 causes cardiac dysfunction under high salt diet in mice2010
Author(s)
Ashitate T, Osanai T, Tanaka M, Magota K, Echizen T, Izumiyama K, Yokoyama H, Shibutani S, Hanada K, Tomita H, Okumura K
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Journal Title
J Hypertens
Volume: 28
Pages: 2243-2251
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