特発性肺線維症におけるアダプター分子の関与

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21590979
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 谷野 美智枝 北海道大学, 大学院・医学研究科, 助教 (90360908)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田中 伸哉 北海道大学, 大学院・医学研究科, 教授 (70261287)
• Keywords: 特発性肺線維症 / アダプター蛋白 / CRK / 上皮間葉移行

Research Abstract

昨年、我々は特発性肺線維症患者の外科病理標本を用いて、免疫染色を施行し、CRKI/II及びCRKの下流蛋白であるDock180,C3Gが肺胞上皮細胞及び間質の線維芽細胞に強く発現することを示し、肺線維症における病的線維化の過程において、肺胞上皮細胞及び線維芽細胞におけるCRKの発現を介したシグナル伝達が関与している可能性を示した。
本年度は肺胞上皮細胞に着目しin vitroの系を用いて、CRKを強発現することによって引き起こされる線維化へのメカニズムを検討した。特に、上皮-間葉移行に着目し、以下の方法を用いて実験を行った。肺胞上皮細胞株としてA549細胞を用い、レトロウィルスベクターを使ってCRKI高発現株、CRKII高発現株を樹立し、コントロール細胞と比較検討を行った。線維化において中心的な役割を果たしているサイトカインであるTGFβ1を5ng/mlで刺激し、48,72時間後にmRNA及び蛋白を抽出した。EMTに関与する転写因子であるslug及び間葉系マーカーであるvimentinのmRNA発現量をsemi quantitative RT-PCR法を用いて測定した。また、肺線維化部分で高発現しているMMP-2,9のmRNAの発現をsemi-quantitative PCR法を用いて測定し、上皮性マーカーであるE-cadherin,間葉系マーカーであるfibronectinの蛋白量を、ウェスタンブロッティング法を用いて定量した。CRKII高発現A549細胞では、TGFβ無刺激の状態でもVimentin mRNA,MMP-9が高発現が認められた。また、TGFβ刺激後にはE-cadherinは減少しVimentin及びMMP9 mRNAはさらに増加した。
以上より、肺線維症病変の肺胞上皮におけるCRKの発現はEMTを介した肺の線維化に関与している可能性がある。

Research Products

• [Journal Article] A case of clear cell variant of solid-pseudopapillary tumor of pancreas in an adult male patient (2011)
  • Author(s): Tanino M, Kohsaka S, Kimura T, Tabu K, Nishihara H, Sawa H, Kawami H, Kamada H, Shimizu M, Tanaka S.
  • Journal Title: Annals of diagnostic pathology Volume: (In press,In press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A case of atypical teratoid/rhabdoid tutu in an adult, with long survaival. (2011)
  • Author(s): Takahashi K, Nishimura H, Katoh M, Yoshinaga T, Habir R, Kanno H, Kimura T, Tanino M, Keda J, Sawamura Y, Nagshima K, Tanaka S.
  • Journal Title: Brain Tumor Pathology Volume: 28 Pages: 71-76
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 急激な経過で死亡した新型インフルエンザ肺炎症例の病理学的検討 (2011)
  • Author(s): 瀧山晃弘、王磊、谷野美智枝、木村太一、西原広史、田中伸哉
  • Journal Title: 分子呼吸器病学 Volume: 1 Pages: 132-136
• [Journal Article] A case of follicular bronchiolitis associated with asthma, eosinophilia, and increased immunoglobulin E. (2010)
  • Author(s): Shimizu K, Konno S, Nasuhara Y, Tanino M, Matsuno Y, Nishimura M.
  • Journal Title: J of Asthma Volume: 47 Pages: 1161-1164
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Radiation-induced osteosarcomas after treatment for frontal gliomas : areport of two cases (2010)
  • Author(s): Ito T, Ozaki Y, Sato K, Oikawa M, Tanino M, Nakamura H, Tanaka S
  • Journal Title: Brain Rumor Pathology Volume: 27 Pages: 103-109
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Dock2 regulates cell proliferation through Rac and ERK activatiob in B cell lymphoma (2010)
  • Author(s): Wang L, Nshihara H, Kimura T, Kato Y, Tanino M, Nishio M, Obara M, Endo T, Koike T, Tanaka S.
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun. Volume: 395 Pages: 111-115
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Sudden death of a patient with pandemic influenza (A/Hlpdm) virus infection by acute respiratory distress syndrome. (2010)
  • Author(s): Takiyama A, Wang L, Tanino M, Kimura T, Kawagusgu N, Kunieda Y, Katano H, Nakajima N, Hasegawa H, Takagi T, Nshihara H, Sata T, Tanaka S.
  • Journal Title: Japanese J Infect Disease Volume: 63 Pages: 72-74
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Involvement of adaptor protein Crk in malignant features of human mesothelioma (2010)
  • Author(s): M Tanino, L Wang, T Kimura, H Nishihara, M Tsuda, Y Matsuno, K Okamoto, S Yano, S Tanaka
  • Organizer: International mesothelioma Interest Group
  • Place of Presentation: 京都 国立京都国際会館
  • Year and Date: 2010-09-01
• [Presentation] 放射線治療後7年間生存し得た原発性悪性心膜中皮腫の一例 (2010)
  • Author(s): 谷野美智枝、ロシャンマハビール、菅野宏美、鈴木宏明、山城勝重、木村太一、西原広、丸川活司、松野吉宏、田中伸哉
  • Organizer: 日本病理学会
  • Place of Presentation: 東京京王プラザホテル
  • Year and Date: 2010-04-28
• [Book] 医療系学生のための病理学 第4版 (2010)
  • Author(s): 中村仁志夫、佐藤達資、石津明洋、田中伸哉、池田仁、渋谷みよ、田中伸哉、成松英明、西原広史、野島孝之、柳輝希、渡邊純
  • Total Pages: 208
  • Publisher: 講談社