2009 Fiscal Year Annual Research Report
癌抑制および癌促進の相反する作用を有するパラフィブロミンの機能解析
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21591180
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
吉本 勝彦 The University of Tokushima, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 教授 (90201863)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岩田 武男 徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 助教 (10350399)
水澤 典子 徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 助教 (80254746)
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| Keywords | 副甲状腺 / 腫瘍 / 癌遺伝子 / 癌抑制遺伝子 |
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| Research Abstract |
「顎腫瘍を伴う副甲状腺機能亢進症」の原因遺伝子HRPT2がコードする531アミノ酸残基からなるパラフィブロミンは、癌抑制蛋白質として細胞増殖を抑制する。一方で、我々はSV40ウイルスのlarge T抗原(LT)発現細胞にパラフィブロミンを過剰発現させると、細胞増殖が促進されること、パラフィブロミンとLTが相互作用していることを見出した。このことは、パラフィブロミンは特定の条件下では癌蛋白質として作用する新しいタイプの癌抑制蛋白質であることを示唆するものである。
パラフィブロミンのLT発現細胞の増殖促進に関与する分子と、パラフィブロミン不活化による細胞増殖に関与する分子を明らかにするため、パラフィブロミンを過剰発現させたLT発現細胞株である293FT細胞とLT非発現細胞株であるHEK293細胞のマイクロアレイ解析をそれぞれ行い、発現変動している遺伝子を比較検討した。現在、マイクロアレイ解析で変動が認められた遺伝子について、同様にパラフィブロミンを発現させた細胞とコントロール細胞間で発現に差異が認められるか否か、リアルタイムRT-PCRによる確認を行っている。
同様にパラフィブロミンをsiRNAにより発現抑制させた細胞についてもマイクロアレイ解析を行い、LT発現細胞株と非発現細胞株で遺伝子発現に差異があるか検討している。
またヒト副甲状細胞株sHPT-1細胞にFLAGタグを付加したパラフィブロミンを強発現させ、FLAG抗体による免疫沈降を行い、副甲状腺細胞中でパラフィブロミンと相互作用する蛋白質を質量分析にて解析中である。
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