2012 Fiscal Year Annual Research Report
新規成長ホルモン不応性成長障害の発症機序に関する分子医学的研究
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21591183
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| Research Institution | Wakayama Medical University |
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Principal Investigator |
京 雪楓 和歌山県立医科大学, 先端医学研究所, 講師 (70316123)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
澤田 貴宏 和歌山県立医科大学, 先端医学研究所, 助教 (00382325)
坂口 和成 和歌山県立医科大学, 先端医学研究所, 教授 (60178548)
宮嶋 正康 和歌山県立医科大学, 共同利用施設, 助教 (80137257)
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| Project Period (FY) |
2009-04-01 – 2013-03-31
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| Keywords | 成長障害 / 成長ホルモン / EphA4 |
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| Research Abstract |
①Epha4およびGHRの肝細胞での共局在の実証：HepG2細胞を用いて内在性EphA4およびGHRに特異的な抗体で免疫染色を実施し、共焦点顕微鏡でそれぞれの受容体の局在を調べた。
②Epha4KOマウスで肝臓でのIgfbp3およびIgfalsmRNA発現およびそれらのタンパク質の血清中の濃度の測定：IGFBP3およびIGFALSは血中でのIGF1の保持に重要な働きをする分子であり、IGF1の作用機序にも大きな関与をするため、それらの発現は重要である。Igfbp3 mRNA発現はGHの影響を受けないが、Igfals mRNA発現はIgf1 mRNA同様GHによる転写レベルでの調節を受けることが知られている。IGFBP3はELISAにより、IGFALSはWestern blottingによりwild typeマウスを基準として比較した。mRNA発現量に関しては、定量的RT-PCRにより定量した。蛋白レベルではIGF1、IGFBP3、IGFALSすべての値がEpha4KOマウスで低下しており、mRNAレベルではIgf1およびIgfals発現が低下していたが、Igfbp3に関しては正常であった。
③内在性のEphA4、GHR、およびJAK2の相互作用の解析：これまでの強制発現細胞での結果を補完するために必要である。それぞれの分子の欠損マウス由来線維芽細胞を用いて２分子間の相互作用を調べた。EphA4-GHRおよびGHR-JAK2の結合が認められた。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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