線溶調節因子PAI―1制御システムの導入による血友病Aインヒビター治療法の開発

2011 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21591249
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 窓岩 清治 自治医科大学, 医学部, 講師 (70296119)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小林 英司 自治医科大学, 医学部, 教授 (00245044) ; 大森 司 自治医科大学, 医学部, 講師 (70382843)
• Keywords: 血友病A / インヒビター / 免疫寛容 / 第VIII因子欠損マウス / PAI-1欠損マウス

Research Abstract

本研究では、線溶系調節因子であるplasminogen activator inhibitor-1(PAI-1)の機能を効率的に制御するシステムを血友病Aマウスモデルに導入することにより、線溶系応答の効果的な制御が抗原特異的な免疫寛容をもたらし、抗第VIII因子同種抗体の発生を防ぐ可能性を探ることを目的して解析を進めた。1)第VIII因子(FVIII)欠損マウスとPAI-1欠損マウスとの交配により作製した新規FVIII/PAI-1ダブルノックアウトマウスの解析から、PAI-1因子の欠損が抗原特異的な免疫寛容をもたらした。2)FVIII反復刺激を行ったFVIII/PAI-1ダブルノックアウトマウスのリンパ節および脾臓からセルソーティング法により単離したCD11b+細胞やCD45R+細胞のMHC-II抗原提示能は、FVIIIノックアウトマウスに比較して有意に低下していた。さらにin vitroでのFVIII刺激によるIL-2、IL-12およびIFN-gammaの産生が増加しない一方で、CD4+CD25+FoxP3+制御性T細胞が誘導された。3)PAI-1RNAi系による線溶調節因子発現制御システムを導入した血友病Aインヒビター治療への展開として、PAI-1shRNAウイルスベクターをFVIII因子欠損マウス由来骨髄細胞c-kit+sca-1+Lin-分画に感染させ細胞移植したPAI-1 shRNA導入FVIII欠損マウスモデルを作成した。本マウスはPAI-1 scrRNA導入個体に比較してFVIII反復刺激後の抗体価が有意に低下していた。これらの結果は、血友病A個体におけるPAI-1の制御が、抗原特異的な免疫寛容をもたらしインヒビターの発症を予防し得る可能性を示すものである。生体防御機構のひとつである線溶系が免疫系制御に関与するという知見は新しく、血友病Aインヒビターの発症予防における新規治療法の開発基盤に繋がる可能性があるものと考えられる。

Research Products

• [Journal Article] FTY720 improves functional recovery after spinal cord injury by primarily nonimmunomodulatory mechanisms (2012)
  • Author(s): Norimatsu, Y., Ohmori, T., Kimura, A., Madoiwa, S., Mimuro, J., Seichi, A., Yatomi, Y., Hoshino, Y., and Sakata, Y
  • Journal Title: Am J Pathol Volume: 180 Pages: 1625-1635
• [Journal Article] Il2rg Gene-Targeted Severe Combined Immunodeficiency (SCID) Pigs (2012)
  • Author(s): Suzuki, S., et al.
  • Journal Title: Cell Stem Cell Volume: (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Immune response against serial infusion of factor VIII antigen through an implantable venous-access device system in haemophilia A mice (2012)
  • Author(s): Madoiwa, S., et al.
  • Journal Title: Haemophilia Volume: 18 Pages: e323-330
  • DOI: 10.1111/j.1365-2516.2011.02686.x
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Lack of association between serum paraoxonase-1 activity and residual platelet aggregation during dual anti-platelet therapy (2012)
  • Author(s): Ohmori, T., et al.
  • Journal Title: Thromb Res Volume: 129 Pages: e36-40
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2011.10.033
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Local regulation of neutrophil elastase activity by endogenous alpha1-antitrypsin in lipopolysaccharide-primed hematological cells (2011)
  • Author(s): Dokai, M., Madoiwa, S., Yasumoto, A., Kashiwakura, Y., Ishiwata, A., Sakata, A., Makino, N., Ohmori, T., Mimuro, J., and Sakata, Y
  • Journal Title: Thromb Res Volume: 128 Pages: 283-292
• [Journal Article] Degradation of cross-linked fibrin by leukocyte elastase as alternative pathway for plasmin-mediated fibrinolysis in sepsis-induced disseminated intravascular coagulation (2011)
  • Author(s): Madoiwa, S., Tanaka, H., Nagahama, Y., Dokai, M., Kashiwakura, Y., Ishiwata, A., Sakata, A., Yasumoto, A., Ohmori, T., Mimuro, J., et al
  • Journal Title: Thromb Res Volume: 127 Pages: 349-355
• [Journal Article] Predictive blood coagulation markers for early diagnosis of venous thromboembolism after total knee joint replacement (2011)
  • Author(s): Watanabe, H., et al.
  • Journal Title: Thromb Res Volume: 128 Pages: e137-143
  • DOI: 101016/j.thromres.2011.07.030
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cross-linked fibrin degradation products by leukocyte elastase (e-XDP) (2011)
  • Author(s): Madoiwa, S., et al.
  • Journal Title: Rinsho Byori Volume: 147 Suppl Pages: 65-70
• [Presentation] 血友病の基礎と臨床-血友病インヒビター発生と免疫寛容 (2012)
  • Author(s): 窓岩清治
  • Organizer: 第115回日本小児科学会学術集会教育セミナー
  • Place of Presentation: 福岡市(招待)
  • Year and Date: 2012-04-20
• [Presentation] 静脈血栓塞栓症に対する経口抗凝固療法の全国調査と自己モニタリングへの展開 (2011)
  • Author(s): 窓岩清治
  • Organizer: 第7回肺血栓塞栓症研究会
  • Place of Presentation: 宇都宮市
  • Year and Date: 2011-11-01
• [Presentation] DICの病態-血栓溶解機構を把握する臨床的意義- (2011)
  • Author(s): 窓岩清治
  • Organizer: 第9回北陸血栓研究会特別講演
  • Place of Presentation: 金沢市(招待)
  • Year and Date: 2011-10-29
• [Presentation] Leukocyte elastase contributes to degradation of cross-linked fibrin in sepsis-induced DIC (2011)
  • Author(s): Madoiwa S., et al.
  • Organizer: The 73rd Annual Meeting of the Japanese Society of Hematology
  • Place of Presentation: Nagoya
  • Year and Date: 2011-10-15
• [Presentation] 造血器悪性腫瘍とDIC-その病態と診断- (2011)
  • Author(s): 窓岩清治
  • Organizer: 第73回日本血液学会学術集会コーポレートセミナー
  • Place of Presentation: 名古屋市(招待)
  • Year and Date: 2011-10-14
• [Presentation] 血友病インヒビター発生に関する考察-動物モデルを用いた免疫寛容誘導法の研究- (2011)
  • Author(s): 窓岩清治
  • Organizer: 血友病PUPs研究会
  • Place of Presentation: 東京(招待)
  • Year and Date: 2011-09-03
• [Presentation] Degradation of cross-linked fibrin by leukocyte elastase as alternative pathway for plasmin-mediated fibrinolysis in sepsis-induced disseminated intravascular coagulation (2011)
  • Author(s): Madoiwa S., et al.
  • Organizer: 23rd Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • Place of Presentation: Kyoto
  • Year and Date: 2011-07-26
• [Presentation] Leukocyte elastase as an alternative pathway for fibrinolysis (2011)
  • Author(s): Madoiwa S., et al.
  • Organizer: 57th Annual SSC Meeting
  • Place of Presentation: Kyoto
  • Year and Date: 2011-07-24
• [Presentation] 敗血症における白血球エラスターゼの作用 (2011)
  • Author(s): 窓岩清治
  • Organizer: 第5回SIRS-DIC研究会
  • Place of Presentation: 宇都宮市
  • Year and Date: 2011-07-01
• [Presentation] 線溶系から捉えたDICの病態-血栓溶解をどのように把握するか- (2011)
  • Author(s): 窓岩清治
  • Organizer: 第13回大阪DIC研究会特別講演
  • Place of Presentation: 大阪市(招待)
  • Year and Date: 2011-06-22
• [Book] 血液専門医テキスト (2011)
  • Author(s): 窓岩清治, 他
  • Publisher: 南江堂
• [Book] 血液内科ゴールデンハンドブック (2011)
  • Author(s): 窓岩清治, 他
  • Total Pages: 462
  • Publisher: 南江堂