2010 Fiscal Year Annual Research Report
新規に開発したEBV感染細胞同定法によるEBV関連疾患の診断および病態解析
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21591384
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
木村 宏 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (30303621)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊藤 嘉規 名古屋大学, 医学部附属病院, 講師 (20373491)
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| Keywords | EBV / FISH / in situ hybridization / 感染細胞 / 慢性活動性EBV感染症 / γδT細胞 / 種痘様水疱症 |
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| Research Abstract |
【研究の目的】 EBV関連リンパ増殖性疾患の診断・発症病理の解明には、EBV感染細胞の定量と同定が必須である。これまで、侵襲の強い病理組織診による感染細胞同定法は確立されているが、末梢血中を用いた再現性の高い方法は無かった。我々はEBV encoded small RNA (EBER)特異的プローブを用い、細胞表面抗原とEBERを連続的に染色するFISH法を確立した。本年度は、症例数を増やして、このFISH法を患者の末梢血へ応用し、様々なEBV関連リンパ増殖性疾患の非侵襲的診断と病態解析に用いた。
【材料と方法】 対象は慢性活動性EBV感染症9例、種痘様水疱症様リンパ腫7例、血球食食性リンパ組織球症4例、全身性EBV陽性T細胞リンパ増殖症2例、NK/T細胞リンパ腫2例、末梢性T細胞リンパ腫1例、アグレッシブNK細胞性白血病1例の計26例。FISH法で末梢血単核球の表面抗原染色と核内EBER染色を連続施行後flow cytometoryで解析した。
【結果】 0.15～67%のリンパ球がEBER陽性で、EBER陽性細胞率0.5%以上の症例は感染細胞の同定が可能だった。2例では2種類の細胞群にEBVの感染を認めた。種痘様水疱症様リンパ腫はγδT細胞5例、NK細胞1例、NKT細胞1例に感染を認めた。本法のEBER陽性細胞率とリアルタイムPCR法のEBV-DNA量に有意な相関を認めた。
【考察】 一定以上の感染細胞が存在する場合、本法によるEBV感染細胞の同定/定量が可能である。特に複数のlineageの細胞にEBVが感染する疾患の診断に有用である。本法は既存の方法で診断の難しいT/NKリンパ増殖性疾患の病理学的診断を補完し、疾患分類や発症病理の解析に役立つと考えた。
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