種々の生体適合性ゲル化物質を足場材料に用いたマウス肺組織移植モデル

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21591825
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 澤藤 誠 Keio University, 医学部, 講師 (10226079)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 渡辺 真純 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (90201227) ; 泉 陽太郎 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (90245506) ; 河野 光智 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (10276272)
• Keywords: 移植・再生医療 / 呼吸器外科

Research Abstract

平成21年度には種々の生体適合性ゲル化物質をscaffold(足場材料)として用いるマウス胎仔肺組織移植モデルを確立した。【ドナー肺組織】妊娠17日目の雌性GFPマウス(C57BL/6-Tg(CAG-EGFP)C15-001-FJ0010sb)をエーテル麻酔後に犠牲死させ、胎仔を摘出する。顕微鏡下に解剖して胎仔肺組織を採取し細切する。組織片は培養液(DMEM)で一時保存する。その後、種々の生体適合性ゲル化物質に混ぜる。使用したのは
(1)アテロコラーゲン注入材(アテロコラーゲンインプラント、コーケン)
(2)フィブリン糊(フィブリノーゲン+トロンビン)(ボルヒール、化学及血清療法研究所)
(3)Thermo-reversible gelation polymer(TGP)(メビオール)
である。【レシピエント手術】レシピエントマウス(野生型C57BL/6)に麻酔後に経口挿管し、人工呼吸器管理下に左開胸する。肺門をクリップにてクランプした後、細切したGFPマウス胎仔肺組織を混じたゲル化物質を、レシピエント左肺の胸膜下肺実質内4～5ヶ所に50μlずつ、先端が鈍な注射針(28ゲージ)にて血管内に入らないように注入する。クランプを解除して空気もれや出血がないことを確認した後、閉胸して手術を終了する。
【結果】移植後24時間、3日後でレシピエントを犠牲死させ、肺を取り出して組織学的検討を行った。(1)、(2)、(3)のいづれのゲルを使用してもGFP蛍光を有する移植片を3日目まで確認することが出来た。