オートファジー誘導による悪性グリオーマ治療抵抗性克服の試み

2011 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21591866
• Research Institution: University of Toyama
• Principal Investigator: 栗本 昌紀 富山大学, 大学病院, 講師 (10161770)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 早川 由美子 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 教務補佐員 (30238092) ; 永井 正一 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 助教 (20372485) ; 林 央周 富山大学, 大学病院, 講師 (50283073)
• Keywords: 悪性グリオーマ / オートファジー / アポトーシス

Research Abstract

培養グリオーマ細胞株を放射線やtemozolomideあるいはcisplatinなどの抗癌剤に暴露させ、その後に生じる形態学的変化と生化学的変化を観察した。放射線照射やtemozolomide作用後の培養グリオーマ細胞には、電子顕微鏡では細胞核の断片化やクロマチンの濃縮は観察されず、アポトーシスの発生はみられないと判断された。一方、cisplatin作用後の細胞では、細胞核の断片化が観察され、アポトーシスの発生が観察された。また放射線照射やtemozolomide、cisplatin作用後のいずれの細胞にもオートファジーにみられるオートファゴゾームの細胞質内発生が多数観察された。イムノブロットでは、LC3の朝照が見られた。以上の結果から培養グリオーマ細胞株においては、放射線やtemozolomide作用後の細胞死の様式は、オートファジーであるがcisplatinのような薬剤はアポトーシスとオートファジーによる細胞死を同時に生じさせると考えられた。オートファジー阻害薬である3-methyl adenineやbafilomycinで細胞を前処理すると放射線や抗癌剤暴露後にアポトーシスを示す細胞が増えた。一方、アポトーシス阻害薬であると同時にNF-kB阻害剤でもあるpitavastatinの前処理を行うとcisplatin作用後にオートファジーによる細胞死が増えアポトーシスが減少した。すなわちグリオーマ細胞においては、アポトーシスとオートファジーのいずれの細胞死の経路もとりうると考えられた。したがってアポトーシスとオートファジーの二つの細胞死の分子シグナル伝達経路の間でクロストークが存在している可能性がある。